不同浓度乙醇在病理切片展片技术中的应用

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  【中图分类号】R319【文献标识码】B【文章编号】1632-5281(2015)10
  【摘要】目的:探讨乙醇在病理切片技术中的应用。方法:对我院各类标本用不同浓度乙醇在切片中进行展片、分析结果。结果:各类标本切片时用不同浓度乙醇进行展片,40%的乙醇展片后组织结构清晰,切片染色均匀、颜色鲜艳、红蓝对比清晰、背景干净、封片无气泡、细胞形态变形微小、切片完整、无脱片现象,优秀制片率大大提高。结论:用40%的乙醇用于病理切片展片中可以提高制片的优秀率,促使病理切片更加完整无皱褶破损,不易脱片,从而染出高质量病理切片。
  【关键词】不同浓度乙醇;病理切片;展片
  随着当今医学技术的不断发展,临床对病理诊断报告的及时性及准确性要求越来越高,病理技术人员对切片的质量也更加重视。普通的温水展片不能够将一些难以处理的切片完全的展开,做不到切片无皱褶无破损,只能重复切片或者调整微米数,浪费了切片中的时间和经历并且直接影响了切片的质量,从而引发后期切片染色不理想,为临床病理诊断带来了难度。在温水漂片前先将切片于40%乙醇中展片这一方法应用之后,相比较传统展片该方法更加简单方便,易于操作,省时快速,明显提高了病理切片的质量。
  1、资料与方法
  (1)资料。在本病理科室内取样,取样包含各类标本如皮肤、肌肉、心脏、骨、淋巴结、肝脏、肠道、脾脏、肺、胃、肾,乳腺、宫颈、子宫内膜、脑组织、子宫肌瘤、输卵管、卵巢等各类组织。
  (2)仪器及方法。TEC2500病理组织漂烘仪(Water Bath-Slide Drier),亦称摊片烤片机或捞片展片机。适用于组织病理学、生物学、形态学、化学、临床和细菌学等实验室中对动植物和人体的组织切片进行摊片烤片烘片。技术参数:电源:220V±10%50HZ或者110V±10%60HZ,功率:600W。温度控制范围:漂片缸:室温~90℃ 烘片槽:室温~90℃ 烤片箱:室温~90℃ 温度控制精度:±1℃。外形尺寸(mm):550(W)x340(D)x140(H)重量:9Kg。
  用10%的中性福尔马林固定液固定组织,根据组织大小时间会有所区别,组织较小时间在4—6小时左右,组织较大时间在18—24小时左右或者更多。将所取组织块放入包埋框,把包埋框放入自动脱水机进行组织的脱水透明浸蜡等程序。包埋后修整蜡块按序号排列整齐放入—20℃冰箱以增加蜡块的硬度便于切片。
  2、结果
  各类组织在漂片仪中经过不同浓度乙醇的展片后、在40%的乙醇中展片最为充分,制作出的病理切片染色均匀、更加完整无皱褶破损、颜色鲜艳、红蓝对比清晰、背景干净、封片无气泡、细胞形态变形微小、切片完整、无脱片现象。
  3、讨论
  组织标本需经固定、脱水、透明、浸蜡等程序后才能进行石蜡包埋切片,普通情况下需时15~20h。切片时展片不充分粘附不彻底,直接导致脱片率变高。展片水温应在42℃至47℃之间,这主要和包埋蜡的熔点有关,水温过高,会引起组织细胞散开,水温过低,切片皱摺无法摊平。包埋蜡中如有二甲苯,也会造成石蜡溶解现象。 而用一次性刀片切的片子,一碰到热水,片子上的皱摺就无法再展开,这有一个方法可以解决:在切完片子后,先把切片放在40%酒精水溶液中,让酒精的张力自动把皱摺展开,然后再将切片移到热水,这样的 片子会较薄;如酒精浓度过高,容易引起切片破碎,出现裂隙,像脂肪之类细胞间粘附性较小的组织一碰到酒精就会散开,故不能用此法。最后捞片时玻片要干净,要选择那些完整 、无皱摺的切片,粘贴于玻片中1/3和下1/3的中间。
  40%乙醇可以充分展片的原因:表面张力形成的机理是界面处的分子受到周围原子向内的合力(要是在液体内部,各个方向受力平衡,合力为零)。表面张力的大小应该取决于这种分子间相互作用的强弱.乙醇分子间,水分子间都有范氏力和氢键,但是水分子的氢键很强.这也决定了水的物理性质于同族氧化物之间有很大区别,这样以来就提供了比单纯在水中漂片更大的分子表面张力。
  综上所述:各类标本切片时用不同浓度乙醇进行展片,40%的乙醇展片后组织结构清晰,切片染色均匀、颜色鲜艳、红蓝对比清晰、背景干净、封片无气泡、细胞形态变形微小、切片完整、无脱片现象,优秀制片率大大提高。
  参考文献
  1. 病理技术 百度文库[引用日期2013-11-19]
  2. 病理切片技术 徕卡医疗[引用日期2013-11-19]
  3. 病理技术的发展和现状 百度文库[引用日期2013-11-19]
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