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[摘要] 目的 探究大蒜素对蟾蜍离体心脏功能的影响及其影响机制。 方法 采用斯氏离体蛙心灌流观察不同浓度的大蒜素溶液和普萘洛尔对蟾蜍离体心脏功能的影响。 结果 0.0005 mg/mL、 0.00275 mg/mL和0.005 mg/mL的大蒜素使心肌收缩加强，且随浓度增加而作用增强，但对心率影响不大；加普萘洛尔后，0.005 mg/mL大蒜素溶液对心肌收缩幅度无明显影响。 结论 大蒜素使蟾蜍离体心脏的心肌收缩力加强，但对心率作用不明显；大蒜素液对心肌收缩的加强作用，可被普萘洛尔所抑制。
[关键词] 大蒜素；蟾蜍离体心脏；心肌收缩力；心率；普萘洛尔
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）10-31-02
近年来有研究报道，大蒜素有减慢窦性心律、抑制心肌收缩、抗心律失常的作用[1]，它通过延长心肌细胞的有效不应期、降低自律性、起到抗心律失常的作用[2]，又有研究报道当大蒜素注射液浓度>0.1736 U/mL时会有导致心脏停搏的危险[3]。低浓度的大蒜素（0.005 mg/mL）随剂量增加可使心肌收缩加强，高浓度（0.05 mg/mL、0.5 mg/mL）大蒜素随剂量增加而使心肌收缩受抑制[4]。对于大蒜素对离体心脏的作用虽然相关研究比较多，但其作用机制仍不十分明确。本次研究拟通过大蒜素对离体心脏的作用，关联β受体阻滞剂，借以探讨大蒜素对离体心脏的作用以及其作用是否与β受体有关。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物与药品 蟾蜍，由川北医学院动物实验中心提供，20只，雌雄兼有，体重相近（25 g左右），发育良好，活力正常；大蒜素注射液（Allitride injection）（徐州莱恩药业
有限公司，H20055246） ，并用任氏液配置成为具有浓度梯度的溶液，浓度分别为0.0005 mg/mL、0.002 75 mg/mL、0.005 mg/mL，普萘洛尔溶液，用任氏液配制成0.005 mg/mL，标准配方任氏液。
1.1.2 试验仪器 BL-410生物信号记录系统（四川成都泰盟电子有限公司产品），机械电换能器，蛙类手术器械，铁架台，蛙板，蛙心插管，滴管，大烧杯，棉线，双凹夹，滑轮等。
1.2 方法
1.2.1 离体心脏标本制备 按文献[5]制备蟾蜍离体心脏标本。
1.2.2 实验分组 A组：观察大蒜素对蟾蜍离体心脏心率和心肌收缩力的影响。10只蟾蜍。离体蟾蜍心脏，待标本稳定10 min后记录药前心搏曲线，吸出任氏液加入0.0005 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线，用任氏液洗涤3次，至曲线基本恢复正常后记录心搏曲线，然后吸出任氏液加入0.002 75 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线，用任氏液洗涤3次，至曲线基本恢复正常后记录心搏曲线，然后再吸出任氏液加入0.005 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线。以上每次给药均保持液面高度2 cm，以及重复以上操作10次，采用药前药后自身对比。B组：观察大蒜素对蟾蜍离体心脏的兴奋作用是否与β受体相关。首先在上面3个剂量中选一个效果最明显的浓度0.005 mg/mL作为实
验浓度。10只蟾蜍。离体蟾蜍心脏，待标本稳定10 min后记录蟾蜍正常的心搏曲线，吸出任氏液加入0.005 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线，用任氏液洗涤3次，至曲线基本恢复正常后记录心搏曲线，然后吸出任氏液再加入0.005 mg/mL普萘洛尔溶液，记录用药后5 min时心搏曲线，吸出普萘洛尔溶液不洗涤直接加入0.005 mg/mL大蒜素液，记录用药后5 min时心搏曲线。以上每次给药均保持液面高度2 cm，以及重复以上操作10次。
1.3 统计学方法
用统计学软件SPSS 16.0进行配对或组间t检验，数据以（）表示，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 不同浓度大蒜素溶液对蟾蜍离体心脏心率和收缩幅度的影响
0.0005 mg/mL、0.002 75 mg/mL、0.005 mg/mL 的大蒜素溶液均可使蟾蜍离体心脏的心肌收缩幅度增强（P<0.01），且随浓度的增加其收缩幅度也增强，呈现剂量依耐性（P<0.05）；每个浓度大蒜素对蟾蜍离体心脏的心率无明显影响（P>0.05）。见表1。
2.2 β受体阻断剂对大蒜素兴奋效应的作用
0.005 mg/mL大蒜素能明显增加心肌收缩幅度（P<0.01），而经普萘洛尔溶液处理后再加入0.005 mg/mL大蒜素溶液其对心肌的收缩幅度无明显增加（P>0.05）。见表2。
3 讨论
实验结果表明，在蟾蜍心脏灌流时， 0.0005 mg/mL、0.002 75 mg/mL、0.005 mg/mL大蒜素溶液对蟾蜍离体心脏活动有明显的加强作用， 主要表现为正性变力效应（心肌收缩幅度增强） ，而对心率无明显影响，且随其浓度的增加，其作用也在增强，呈现剂量依耐性。大蒜素的这种加强心肌收缩强度而不改变心搏频率的作用， 有利于改善心脏功能[6-8]。由于本实验是在离体心脏上观察， 不受神经因素和其他体液因素的影响， 故认为大蒜素的这种心加强效应是对心肌的直接作用[9-10]。通过关联β受体阻断剂普萘洛尔，经普萘洛尔溶液处理后再加入0.005 mg/mL大蒜素溶液其对心肌的收缩幅度无明显增加（P>0.05），说明大蒜素对心肌的缩幅度增强作用可被普萘洛尔所抑制，提示大蒜素使蟾蜍离体心脏收缩加强作用有可能与心肌细胞膜上的β受体有关。
[参考文献]
[1] Matin N.Antiarrhythmic Profile of a garlic dialysate assayed in dogs and isolated atrial preparations[J].J Ethnopharma-col，1994，43（1）：1.
[2] 宴莉，黄起壬.大蒜素药理作用和作用机理的探讨[J].实用临床医学，2008，9（1）：1.
[3] 苏桂兰，孟民杰，石磊，等.大蒜素注射液及大蒜制剂对心脏毒副作用[J].时珍国医国药，1999，1：3.
[4] 曹立军，王进，李应全.大蒜素对离体蛙心心肌收缩力的影响[J].齐鲁药事，2005，24（11）：1.
[5] 郑倩.医学机能学实验[M].北京：科学出版社，2009：128.
[6] 廖家有，夏勇.大蒜素对腹主动脉缩窄大鼠左室肥厚及钙调神经磷酸酶信号通路的影响[J].中国医药导报，2012，9（5）：18-20.
[7] 蓝景生，潘兴寿，黄照河，等.大蒜素对柯萨奇病毒B3感染的小鼠心肌炎免疫和心肌损伤的影响[J].临床和实验医学杂志，2006，5（9）：1261-1263.
[8] 魏清芳.大蒜的临床新用[J].中国医药导报，2007，4（6）：86-87.
[9] 邵力钧，单文卫.大蒜素的临床应用进展[J].中国现代医生，2009，47（3）：45-47.
[10] 杜绍安，杜丽君.大蒜素治疗冠心病心绞痛的临床观察（附72例报告）[J].中国医药导报，2008，5（9）：155-156.
（收稿日期：2013-04-15）
[关键词] 大蒜素；蟾蜍离体心脏；心肌收缩力；心率；普萘洛尔
[中图分类号] R285 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2013）10-31-02
近年来有研究报道，大蒜素有减慢窦性心律、抑制心肌收缩、抗心律失常的作用[1]，它通过延长心肌细胞的有效不应期、降低自律性、起到抗心律失常的作用[2]，又有研究报道当大蒜素注射液浓度>0.1736 U/mL时会有导致心脏停搏的危险[3]。低浓度的大蒜素（0.005 mg/mL）随剂量增加可使心肌收缩加强，高浓度（0.05 mg/mL、0.5 mg/mL）大蒜素随剂量增加而使心肌收缩受抑制[4]。对于大蒜素对离体心脏的作用虽然相关研究比较多，但其作用机制仍不十分明确。本次研究拟通过大蒜素对离体心脏的作用，关联β受体阻滞剂，借以探讨大蒜素对离体心脏的作用以及其作用是否与β受体有关。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试验动物与药品 蟾蜍，由川北医学院动物实验中心提供，20只，雌雄兼有，体重相近（25 g左右），发育良好，活力正常；大蒜素注射液（Allitride injection）（徐州莱恩药业
有限公司，H20055246） ，并用任氏液配置成为具有浓度梯度的溶液，浓度分别为0.0005 mg/mL、0.002 75 mg/mL、0.005 mg/mL，普萘洛尔溶液，用任氏液配制成0.005 mg/mL，标准配方任氏液。
1.1.2 试验仪器 BL-410生物信号记录系统（四川成都泰盟电子有限公司产品），机械电换能器，蛙类手术器械，铁架台，蛙板，蛙心插管，滴管，大烧杯，棉线，双凹夹，滑轮等。
1.2 方法
1.2.1 离体心脏标本制备 按文献[5]制备蟾蜍离体心脏标本。
1.2.2 实验分组 A组：观察大蒜素对蟾蜍离体心脏心率和心肌收缩力的影响。10只蟾蜍。离体蟾蜍心脏，待标本稳定10 min后记录药前心搏曲线，吸出任氏液加入0.0005 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线，用任氏液洗涤3次，至曲线基本恢复正常后记录心搏曲线，然后吸出任氏液加入0.002 75 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线，用任氏液洗涤3次，至曲线基本恢复正常后记录心搏曲线，然后再吸出任氏液加入0.005 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线。以上每次给药均保持液面高度2 cm，以及重复以上操作10次，采用药前药后自身对比。B组：观察大蒜素对蟾蜍离体心脏的兴奋作用是否与β受体相关。首先在上面3个剂量中选一个效果最明显的浓度0.005 mg/mL作为实
验浓度。10只蟾蜍。离体蟾蜍心脏，待标本稳定10 min后记录蟾蜍正常的心搏曲线，吸出任氏液加入0.005 mg/mL大蒜素，记录用药后5 min时心搏曲线，用任氏液洗涤3次，至曲线基本恢复正常后记录心搏曲线，然后吸出任氏液再加入0.005 mg/mL普萘洛尔溶液，记录用药后5 min时心搏曲线，吸出普萘洛尔溶液不洗涤直接加入0.005 mg/mL大蒜素液，记录用药后5 min时心搏曲线。以上每次给药均保持液面高度2 cm，以及重复以上操作10次。
1.3 统计学方法
用统计学软件SPSS 16.0进行配对或组间t检验，数据以（）表示，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 不同浓度大蒜素溶液对蟾蜍离体心脏心率和收缩幅度的影响
0.0005 mg/mL、0.002 75 mg/mL、0.005 mg/mL 的大蒜素溶液均可使蟾蜍离体心脏的心肌收缩幅度增强（P<0.01），且随浓度的增加其收缩幅度也增强，呈现剂量依耐性（P<0.05）；每个浓度大蒜素对蟾蜍离体心脏的心率无明显影响（P>0.05）。见表1。
2.2 β受体阻断剂对大蒜素兴奋效应的作用
0.005 mg/mL大蒜素能明显增加心肌收缩幅度（P<0.01），而经普萘洛尔溶液处理后再加入0.005 mg/mL大蒜素溶液其对心肌的收缩幅度无明显增加（P>0.05）。见表2。
3 讨论
实验结果表明，在蟾蜍心脏灌流时， 0.0005 mg/mL、0.002 75 mg/mL、0.005 mg/mL大蒜素溶液对蟾蜍离体心脏活动有明显的加强作用， 主要表现为正性变力效应（心肌收缩幅度增强） ，而对心率无明显影响，且随其浓度的增加，其作用也在增强，呈现剂量依耐性。大蒜素的这种加强心肌收缩强度而不改变心搏频率的作用， 有利于改善心脏功能[6-8]。由于本实验是在离体心脏上观察， 不受神经因素和其他体液因素的影响， 故认为大蒜素的这种心加强效应是对心肌的直接作用[9-10]。通过关联β受体阻断剂普萘洛尔，经普萘洛尔溶液处理后再加入0.005 mg/mL大蒜素溶液其对心肌的收缩幅度无明显增加（P>0.05），说明大蒜素对心肌的缩幅度增强作用可被普萘洛尔所抑制，提示大蒜素使蟾蜍离体心脏收缩加强作用有可能与心肌细胞膜上的β受体有关。
[参考文献]
[1] Matin N.Antiarrhythmic Profile of a garlic dialysate assayed in dogs and isolated atrial preparations[J].J Ethnopharma-col，1994，43（1）：1.
[2] 宴莉，黄起壬.大蒜素药理作用和作用机理的探讨[J].实用临床医学，2008，9（1）：1.
[3] 苏桂兰，孟民杰，石磊，等.大蒜素注射液及大蒜制剂对心脏毒副作用[J].时珍国医国药，1999，1：3.
[4] 曹立军，王进，李应全.大蒜素对离体蛙心心肌收缩力的影响[J].齐鲁药事，2005，24（11）：1.
[5] 郑倩.医学机能学实验[M].北京：科学出版社，2009：128.
[6] 廖家有，夏勇.大蒜素对腹主动脉缩窄大鼠左室肥厚及钙调神经磷酸酶信号通路的影响[J].中国医药导报，2012，9（5）：18-20.
[7] 蓝景生，潘兴寿，黄照河，等.大蒜素对柯萨奇病毒B3感染的小鼠心肌炎免疫和心肌损伤的影响[J].临床和实验医学杂志，2006，5（9）：1261-1263.
[8] 魏清芳.大蒜的临床新用[J].中国医药导报，2007，4（6）：86-87.
[9] 邵力钧，单文卫.大蒜素的临床应用进展[J].中国现代医生，2009，47（3）：45-47.
[10] 杜绍安，杜丽君.大蒜素治疗冠心病心绞痛的临床观察（附72例报告）[J].中国医药导报，2008，5（9）：155-156.
（收稿日期：2013-04-15）