鲨源单域抗体文本库的构建及其在水产品安全控制中的应用

来源 :中国食品科学技术学会第十五届年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenxiang1006
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  单域抗体是利用基因工程技术从骆驼科动物和软骨鱼类血清中克隆得到的只保留重链可变区且具有抗原结合活性的新型抗体,与传统抗体相比,单域抗体具有分子量小、亲和性高、稳定性好、穿透力强的特点,除了能与抗原特异性识别用于免疫检测外,还能通过与抗原物质的结合直接抑制抗原活性,作为新型生物材料在食品、医药等领域有着广泛的应用。本课题组以铰口鲨为免疫动物,收集免疫后的鲨鱼外周血细胞提取RNA,克隆单域抗体目的基因,通过基因重组技术构建噬菌粒载体,导入大肠杆菌构建单域抗体文本库,利用噬菌体展示技术,从文本库中分别淘选得到了针对丝氨酸蛋白酶、多酚氧化酶、恩诺沙星、诺氟沙星等水产品典型危害因子的特异性单域抗体噬菌粒。研究结果表明所构建单域抗体的文本库库容在107 以上,经过噬菌体展示三轮淘选后,可得到针对不同目标抗原的特异性单域抗体噬菌粒,该噬菌粒可有效抑制两种蛋白酶的活性,同时对小分子药物抗原具有良好的识别性能,经克隆表达后可作为潜在的蛋白酶抑制剂和特异性识别材料用于水产品安全危害因子的控制与检测。
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