【摘 要】
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为了制备沙拉沙星(Sarafloxacin,SALX)广谱特异性抗体,将沙拉沙星与3-溴丙胺氢溴酸盐(3-bromopropylamine hydrobromide)反应,生成沙拉沙星的氨基衍生物(SALX-NH2),通过
【机 构】
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河北省农产品食品质量安全分析检测重点实验室(河北北方学院) 河北张家口 075000
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为了制备沙拉沙星(Sarafloxacin,SALX)广谱特异性抗体,将沙拉沙星与3-溴丙胺氢溴酸盐(3-bromopropylamine hydrobromide)反应,生成沙拉沙星的氨基衍生物(SALX-NH2),通过制备液相进行纯化,用红外光谱(IR)、电喷雾电离质谱(ESI-MS)与核磁共振法(NMR)进行鉴定;将沙拉沙星衍生物分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)进行偶联,分别制备免疫抗原(SALX-NH2-BSA)和包被抗原(SALX-NH2-OVA),并用紫外光谱法进行鉴定.用免疫抗原免疫昆明小鼠,制备沙拉沙星衍生物多克隆抗体.通过ELISA 方阵滴定法,确定包被抗原的最佳包被浓度和抗体最佳稀释度,建立了SALX-NH2 间接竞争ELISA 检测方法,线性回归直线方程为y =-17.763x+89.239(R2 =0.9955),其半抑制浓度(IC50)为161.81 ng/mL,最低检出限(LOD)为18.62 ng/mL,该抗体具有广谱特异性,可与多种氟喹诺酮类药物发生交叉反应,可进行氟喹诺酮类药物残留的多元检测.
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