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急性髓系白血病是一种恶性的血液癌症,治疗方式有限。蒽环类和嘧啶类药物都是白血病常用化疗药物,大剂量治疗效果好,但是毒副作用明显,因此降低这些化疗药物的毒副作用,提高其疗效是临床迫切需要解决的科学问题。抗菌肽PFR具有分子量小,合成成本低,无明显毒副作用等优点成为研究药物联合作用的首选。本论文拟探究PFR肽联合蒽环类或嘧啶类化疗药物后对急性髓系白血病HL60细胞增殖的作用及其潜在分子机制。细胞增殖活力实验结果显示,PFR肽联合蒽环类药物阿霉素不能显著协同抑制HL60细胞的增殖,但是PFR肽联合嘧啶类药物阿糖胞苷对HL60细胞增殖具有显著的协同抑制作用。通过流式细胞术检测发现该协同抑制作用是通过坏死途径发生的,流式细胞术检测120μM PFR肽处理组的坏死比例是26.82±0.47%,1.8μM阿糖胞苷组为16.2±1.44%,联合加药组为51.93±0.40%,与单独加药组相比联合加药组HL60细胞坏死比例显著增加。进一步通过PI吸收实验和LDH释放实验也证实PFR肽联合阿糖胞苷协同抑制HL60增殖是通过坏死途径所介导的。坏死抑制剂Nec-1能显著缓解PFR肽联合阿糖胞苷后引起的HL60细胞增殖抑制作用。PFR肽能增加胞质钙流,阿糖胞苷单独使用虽然不能增加胞质钙流,但是联合加药组胞质钙较PFR肽单独加药组显著升高。胞质钙螯合剂BAPTA-AM和无钙培养基处理联合加药组细胞均能显著缓解HL60细胞的坏死,提示PFR肽联合阿糖胞苷引起的HL60坏死是通过胞质钙流的升高来介导的。流式细胞术检测发现PFR肽联合阿糖胞苷后还能引起胞质活性氧的显著增高,以对照组胞质活性氧释放为1,120μM PFR肽组的活性氧释放为2.20±0.11%,1.2μM阿糖胞苷组为1.75±0.22%,联合加药组为3.18±0.32%。为了进一步验证PFR肽联合阿糖胞苷在体内的抑瘤效果,在荷瘤裸鼠模型中进行了动物水平实验研究。研究结果显示:对照组裸鼠瘤重1.35±0.13 g,PFR肽处理组裸鼠瘤重为0.97±0.06 g,阿糖胞苷处理组裸鼠瘤重为0.92±0.13 g,联合组裸鼠瘤重0.61±0.10 g。联合加药组的肿瘤重量显著小于对照组,且没有明显的毒副作用。总之,本研究发现PFR肽与蒽环类的阿霉素无明显协同效果,但是与嘧啶类的阿糖胞苷联合能显著抑制急性髓系白血病HL60细胞的增殖,其机制是二者联合后能能引起胞质钙流升高后介导的细胞坏死。该研究结论为临床急性髓系白血病的治疗提供了坚实的理论基础和新思路。