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先天免疫作为机体的第一道防线,在抵抗病原入侵和诱导后天免疫的过程中发挥着重要的作用。TRAF-3和TRAF-6作为TRAF家族的两个重要成员,其在哺乳动物的先天抗病毒免疫过程中发挥着重要的作用,但是其是否也参与了鸡的先天抗病毒免疫通路呢?本试验首先通过设计特异的引物对鸡的TRAF3.TRAF6基因的CDS区进行克隆；然后通过定量PCR技术,分析了TRAF-3和TRAF-6基因在鸡心、肝、脾等共11个组织中表达分布；接着我们分别转染双链的DNA-Poly(dA:dT)和双链的RNA-Poly(I:C)进入鸡的胚胎成纤维细胞,通过Real-time PCR检测TRAF3、TRAF6基因及其下游基因在鸡胚成纤维细胞抵抗外源的DNA和RNA免疫过程中的表达量的变化；同时我们采用细胞攻毒试验,分析了TRAF3、TRAF6基因及其下游基因在鸡胚成纤维细胞感染新城疫病毒后的表达变化,进一步确定其在鸡抗病毒免疫过程中的作用。最后我们选用将80只10日龄SPF白来航雏鸡,分别通过腹腔注射注射接种0.1m1中等毒力和标准强毒病毒稀释液病毒。在感染新城疫病毒后24h、48h、96h进行采样。其中攻毒组每次采样5只鸡,对照组每次采样4只鸡。每只鸡分别采集脾脏、胸腺和法氏囊组织,利用荧光定量的方法进一步确定TRAF3、TRAF6基因及其下游基因在鸡体内抗病毒免疫过程中的作用。主要研究结果如下：1)通过对鸡TRAF3、TRAF6基因进行克隆,序列比对之后得到了TRAF3的2个预测序列和1个新的序列,TRAF6得到1个预测序列和1个新的序列。我们发现鸡的TRAF3、TRAF6的蛋白结构与人类的蛋白结构相似,猜测鸡的TRAF3、 TRAF6基因与人类TRAF3、TRAF6基因有相似的功能。2)对TRAF3、TRAF6基因在不同组织中的表达进行分析,发现其在脾脏、肺和胸腺中的表达量最为丰富,极显著(p<0.01)高于其它组织。说明TRAF3和TRAF6基因可能主要参与在鸡脾脏、肺、胸腺中的先天免疫。3) 通过转染Poly(dA:dT)和Poly(I:C)进入鸡胚成纤维细胞,我们发现TRAF3、 TRAF6及其下游基因表达量在感染2种模式病毒后,随着浓度或者感染时间的增加,TRAF3、TRAF6及其下游基因的表达都会有所上调,而且达到一定浓度或者时间时,其表达会显著上调。说明TRAF3、TRAF6基因可能参与结合识别DNA模式病毒和双链RNA模式病毒的过程,能够诱导下游基因产生干扰素和白细胞介素等来抵御病原微生物的入侵。而且他们对于病毒转染后的抗病毒免疫应答有浓度与时间的依赖性。4)在病毒不同MIO及不同NDV感染CEF后,TRAF3/6及其下游基因表达都有所上调,在MIO=1时转染8h或者12h时,TRAF3/6及其下游基因的极显著(p<0.01)表达。说明TRAF3/6参与了抗病毒免疫应答机制过程,而且对于病毒有浓度与时间的依赖性。5)在新城疫病毒感染10日龄SPF白来航雏鸡后,我们发现小鸡的脾脏、胸腺、法氏囊感染不同毒力毒株的NDV后,TRAF3、TRAF6基因及其下游基因在胸腺、脾脏和法氏囊中都显著的上调。上述结果说明TRAF3、TRAF6参与了机体的先天免疫应答机制中,而且不同毒株对于TRAF3/6有倾向的诱导作用。