不同寄主对烟蚜种群的影响及TuMV、TMV和CMV CP基因克隆及序列分析

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lizhihua511352981
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
烟草是重庆市的重要经济支柱产业。但近年来烟草花叶病毒病和烟蚜Myzus persicae(Sulzer)发生普遍、危害严重,已成为各烟区威胁烟叶生产的主要病虫害,给烟叶生产造成巨大经济损失。本文对比研究了3种寄主及感染TuMV的相应寄主对烟蚜生长发育和繁殖的影响;成功克隆出烟草TuMV、TMV和CMV分离物的CP基因,进行了序列测定和分析。其研究结果为进一步探明植物寄主、烟草花叶病毒和烟蚜的关系,控制烟蚜的发生和烟草花叶病毒病的传播奠定了一定基础;为烟区TuMV、TMV和CMV病毒株系分化研究,病毒外壳蛋白表达,生产高效价的抗血清,建立烟草花叶病毒田间快速检测体系提供了技术支持。本文主要研究结果如下:1 3种寄主及感染TuMV的相应寄主对烟蚜生长发育的影响本文在供试温度25±0.5℃、相对湿度75±5%、光周期L:D=14:10条件下,研究了3种寄主及感染TuMV的相应寄主对烟蚜生长发育和繁殖的影响,结果表明,烟蚜具有一定的寄主适应性,寄主植物对烟蚜生长发育和繁殖存在显著影响。在其他条件相同的情况下,在3种健康寄主中,青菜上的烟蚜若虫历期最短(5.6929d),产仔量(34.4286头)最大,产仔高峰日出现最早,死亡高峰日出现得最晚;运用生命表参数对烟蚜取食这3种寄主后的生长发育、繁殖情况进行综合评价,结果表明烟蚜在3种健康寄主植物上的r_m大小顺序排列为:青菜(0.2681)>甘蓝(0.2572)>烟草(0.2271),说明烟蚜最嗜取食青菜,且在青菜上繁殖力最强,其次为甘蓝,最不嗜取食烟草。3种寄主病株对烟蚜生长发育和繁殖也有一定影响。烟蚜取食烟草病株和甘蓝病株的产仔量分别为21.4143头和21.4727头,显著高于取食青菜病株的产仔量(13.2714头);3种感病寄主按产仔高峰大小排序为:甘蓝病株(4.0455头)>烟草病株(2.7647头)>青菜病株(1.6508头);烟草病株和甘蓝病株上的产仔高峰日皆为第11天,青菜病株为第14天。说明青菜病株上烟蚜繁殖力最弱,而烟草病株和甘蓝病株上烟蚜繁殖力没有显著差异。烟蚜在3种寄主病株上的r_m大小顺序排列为:甘蓝病株(0.2556)>烟草病株(0.2158)>青菜病株(0.1729),结果表明青菜病株对烟蚜影响最大,烟草病株次之,甘蓝病株对烟蚜的影响最小。与取食健康寄主相比,3种寄主病株均导致烟蚜若蚜的存活率和成蚜的繁殖力降低。在3种寄主健株和病株上,Weibull模型c值均大于1,烟蚜存活率曲线都属于Ⅰ型。在健康甘蓝上的c值最大(4.9265),存活率下降最快,烟草病株上的c值最小(2.2708),存活率下降最慢:烟草病株和甘蓝病株上的烟蚜死亡高峰日均比健康寄主上的提前,而青菜病株上的烟蚜死亡高峰日则比健康寄主上的晚;3种寄主病株和健株上烟蚜历期和繁殖力比较的结果显示,甘蓝病株导致烟蚜若虫龄期延长,而使成虫寿命缩短,产仔量减少;在青菜病株上,烟蚜若虫期显著长于在健康植株上的若虫期,在病株上的产仔量则显著降低;与健株相比,在烟草病株上的烟蚜除了1龄若虫历期和成蚜繁殖前期显著缩短外,若虫期、成虫寿命和产仔量都没有显著差异。以上结果表明,烟蚜虽然最嗜取食青菜,且在青菜上繁殖力最强,青菜有利于烟蚜生长发育和繁殖,但感染TuMV的青菜病株对烟蚜种群的影响也最大。与健株相比,烟草病株对烟蚜生长发育和繁殖没有显著影响。2武隆烟区TuMV、TMV和CMV外壳蛋白基因克隆及序列分析本研究从少量的病叶中提取到高质量的总RNA,利用RT-PCR分别扩增出重庆武隆烟区TuMV、TMV和CMV分离物的CP基因,并成功克隆了这3种病毒的CP基因,完成了序列测定,进行了同源性分析和系统发育树构建。这为烟区TuMV、TMV和CMV病毒株系分化研究和建立烟草花叶病毒田间快速检测体系提供了技术支持。同源性比较结果表明,本实验克隆的TuMV CP基因与GenBank上部分TuMV CP基因序列核苷酸同源性在86.1%~99.6%之间,氨基酸同源性在92.3%~99.0%之问。与TuMV-CO同源性最高的是AY090660(Tu7),核苷酸同源性为99.6%,氨基酸同源性为99.0%。同源性比较和系统发生树表明,这些病毒分离物可分为4组,而重庆分离物与world-B组分离物同源性较高,由此可以确定TuMV重庆分离物属于Brassica(B)致病型中的world-B组。将本实验分离的TMV分离物与已知的TMV序列进行比较,核苷酸同源性在71.9%~99.8%之间,氨基酸同源性在78.5%~100.0%之间。其中与本实验分离的TMV分离物同源性最高的为Yunnan分离物(DQ352813),核苷酸和氨基酸同源性分别高达99.8%和100.0%,表明它们可能为同一株系。经同源性比较,结果显示本实验分离的CMV分离物与已知序列的核苷酸同源性在75.1%~99.5%之间,氨基酸同源性在77.5%~98.6%之间,这些分离物总体可分为两大组,S70105、Z12818、D00463、U22822、AF198103、L15336和AJ131622为组Ⅱ,其余为组Ⅰ。除了D49496,亚组Ⅰ与CMV-CQ的核苷酸和氨基酸序列同源性均在90.0%以上;而与CMV亚组Ⅱ的核苷酸和氨基酸同源性仅在75.1%~76.7%和77.5%~80.2%之间,所以CMV-CQ分离物应该归属于CMV亚组Ⅰ。
其他文献
小学阶段是培养学生思维与意识的关键时期,教师在语文课堂教学中应用传统文化精华内容,激发小学生的文化意识和民族意识,使学生能够受到优秀传统文化的影响,树立起正确的人生
马克思说:“我只知道一门学科,那就是历史学.”历史是一门通晓古今,纵横中外,包罗万象的综合性学科,与其他学科联系密切,特别是文科学科语文、政治、地理等.如果能有机地将文
随着新课程的不断改革和发展,初中语文教师在课堂教学中.借助情境教学,不断提高学生的学习兴趣,提升自身的语文素养.但是大部分的初中生都处于叛逆期,不容易管教.所以初中语
良好的人文环境能够很好的激发小学生的阅读兴趣.孩子们对传统故事等有着天然的兴趣,传统故事背后的传统精神能在很大程度上影响孩子们世界观的形成.开展“讲故事”等活动能
作文是语文学习的一个重点.好文章是改出来的,作文的修改离不开作文的讲评,讲评环节实施得好,学生在修改作文时就会收到事半功倍的效果.
在新课改的背景下,小学数学教学结构发生了巨大的变化,教师认识到了传统教学模式的弊端,积极运用新型的教学模式,以学定教就是其中之一.在以往的教学中,教师会提前备课,在课
目的构建COX比例风险预测模型与人工神经网络预测模型,对脑胶质瘤患者术后生存质量进行评价,为临床医师提供简单、准确的评估方法。方法收集2010年6月至2013年8月山西省肿瘤
采用二次正交回归组合设计的方法,研究粉锈宁在杂交水稻后期应用的防衰、防病 效果和最佳施用技术。经微机计算分析表明:施用粉锈宁防衰保叶和兼防叶尖干枯病、稻曲病的 最佳用
在社会经济不断发展的推动下,教育改革理念逐渐深入,初中政治教学受到社会各界人士的广泛关注.由于初中政治教材中的内容具备大量的理论和很强的实践性,所以政治教学对青少年
谷胱甘肽S-转移酶(Glutathione S-transferases)是生物体内广泛存在的一类重要解毒酶。它能够催化还原性谷胱甘肽的硫醇基与各种亲电化合物相结合,增加后者的可溶性从而有利于其