目的：运动训练是治疗儿童中风的有效方法之一。运动训练治疗儿童中风的神经保护机制亟需研究。本实验中，我们评估了跑台训练对幼年大鼠脑缺血后自噬的影响。
　　方法：对大鼠（23-25日龄）进行脑缺血再灌注手术。将实验动物分为5组，假手术组（Sham，n=16）；模型组（MCAO，n=35）；跑台训练模型组（EX+MCAO，n=35）；RAPA模型组（RAPA+MCAO，n=35）；跑台训练联合RAPA模型组（EX+RAPA+MCAO，n=35）。除Sham组外，其它四组随机均等分为3天和7天两个时间段。我们进行了一系列实验检测，包括脑血流监测、神经行为学评分、苏木精-伊红染色、NISSL染色、三苯基四唑氯化物染色、蛋白质印迹分析、免疫共沉淀、免疫荧光、酶联免疫吸附测定、透射电镜和原位末端凋亡法。
　　结果：1.模型评价
　　1.1神经行为学评分：MCAO后第3天和第7天，EX+MCAO组的神经行为学评分低于MCAO组的评分（两者分别为p＜0.05和p＜0.01）。但是，RAPA+MCAO组的神经行为学评分比MCAO组高（两者均为p＜0.05）。在MCAO后第3天和第7天，与EX+RAPA+MCAO组相比，EX+MCAO组的评分降低（两者均为p＜0.05），而RAPA+MCAO组的评分较高（两者分别为p＜0.05和p＜0.01）。
　　1.2脑梗死体积：MCAO后第3天和第7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组的脑梗死体积显著减少（两者均为p＜0.05），而RAPA+MCAO组的脑梗死体积显著增加（两者分别为p＜0.05和p＜0.01）。与MCAO后第3天和第7天的EX+RAPA+MCAO组相比，RAPA+MCAO组的脑梗死体积显著增加（两者均为p＜0.05）。仅在第7天，EX+MCAO组的脑梗死体积比EX+RAPA+MCAO组低（p＜0.01）。
　　2.跑台训练和RAPA注射对缺血半暗带中自噬的影响
　　2.1LC3变化：MCAO后第3天和第7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组中LC3表达显著减少（两者均为p＜0.05），而RAPA+MCAO组则显著增加（两者分别为p＜0.001和p＜0.01）。MCAO后第3天和第7天，与EX+RAPA+MCAO组相比，EX+MCAO组LC3表达降低（两者均为p＜0.01），而RAPA+MCAO组显著增加（两者分别为p＜0.01和p＜0.05）。通过IF检测LC3阳性细胞数总体趋势与WB结果一致。
　　2.2P62变化：MCAO后第3天和第7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组P62表达显著增加（均p＜0.05），但RAPA+MCAO组的表达显著降低（两者均为p＜0.01）。与MCAO后第3天和第7天的EX+RAPA+MCAO组相比，EX+MCAO组P62表达显著增加（两者均为p＜0.01），但RAPA+MCAO组的表达显著降低（两者均为p＜0.05）。P62的IF结果与WB结果基本一致。
　　2.3神经元超微结构：除Sham组外，其它组中线粒体显示不同程度的肿胀，细胞核不同程度的变形，并且观察到不同数量的溶酶体和自噬体。在MCAO后第3天，RAPA+MCAO组中观察到了最大数量的溶酶体和自噬体。在EX+MCAO组中，溶酶体和自噬体的数量最低。
　　3.跑台训练和RAPA注射对缺血半暗带中HMGB1的影响
　　3.1HMGB1易位：在MCAO后3天和7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组显示较少HMGB1转移（两者均为p＜0.05），而RAPA+MCAO组显示较多转移（两者均为p＜0.001）。此外，与两个时间点的EX+RAPA+MCAO组相比，EX+MCAO组表现出较少的转移（两者分别为p＜0.05和p＜0.01），而RAPA+MCAO组表现出较多的转移（p＜0.05和p＜0.001）。血清中HMGB1结果显示，在MCAO后第3天和第7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组的HMGB1表达明显降低（两者分别为p＜0.01和p＜0.05）。
　　3.2HMGB1和Beclin1表达：MCAO后第7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组的HMGB1/Beclin1阳性细胞数量显著减少（p＜0.01），而RAPA+MCAO组的HMGB1/Beclin1阳性细胞数量显著增加（p＜0.001）。与EX+RAPA+MCAO组相比，EX+MCAO和RAPA+MCAO组中HMGB1/Beclin1阳性细胞数量显著变化（两者均为p＜0.05）。
　　同时检查HMGB1和Beclin1蛋白的表达水平。MCAO后3天和7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组细胞质中HMGB1表达显著下降（两者均为p＜0.05）。而HMGB1表达在RAPA+MCAO组显著增加（两者分别为p＜0.05和p＜0.01）。在3天和7天两个时间点，与EX+RAPA+MCAO组相比，EX+MCAO组表达的HMGB1显著减少（两者分别为p＜0.05和p＜0.01），而RAPA+MCAO组HMGB1表达显著增加（两者均为p＜0.05）。Beclin1总体趋势与HMGB1基本一致。
　　3.3HMGB1/Beclin1结合：在MCAO后第7天，与MCAO组相比，EX+MCAO组HMGB1/Beclin1结合显著降低（p＜0.05），而RAPA+MCAO组则显著升高（p＜0.001）。与EX+RAPA+MCAO组相比，EX+MCAO组结合的HMGB1/Beclin1明显减少（p＜0.01），而RAPA+MCAO组结合增多（p＜0.01）。
　　4.跑台训练和RAPA注射对缺血半暗带中细胞凋亡的影响
　　实验检测MCAO后第3天和第7天TUNEL阳性细胞数量。与MCAO组相比，EX+MCAO组的TUNEL阳性细胞数量在两个时间点显著减少（两者分别为p＜0.05和p＜0.001），但RAPA+MCAO组的TUNEL阳性细胞数量显著增加（两者均为p＜0.05）。与EX+RAPA+MCAO组相比，在MCAO之后的两个时间点，RAPA+MCAO组中TUNEL阳性细胞的数量均显著增加（两者均为p＜0.01）。
　　结论：跑台训练可通过抑制自噬及HMGB1/Beclin1的结合来改善CI/R引起的神经功能缺损。