【摘 要】
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目的:提取分离甘草中具有抗RSV作用的新的活性成分及其抗RSV作用机制,为治疗呼吸道合胞病毒感染寻找新型药物。
方法:甘草水提液经柱醇沉、大孔吸附树脂柱层析、薄层层析展
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目的:提取分离甘草中具有抗RSV作用的新的活性成分及其抗RSV作用机制,为治疗呼吸道合胞病毒感染寻找新型药物。
方法:甘草水提液经柱醇沉、大孔吸附树脂柱层析、薄层层析展开得一抗病毒有效成分GX-2。运用液质联用技术对GX-2进一步提纯和鉴定。利用体外细胞培养技术,用目测法和MTT法检测GX-2对Hela细胞的毒性。以病毒唑为阳性对照,对GX-2进行体外抗呼吸道合胞病毒的药效学检测。用CPE测得病毒唑和GX-2对呼吸道合胞病毒的半数有效剂量。用Kruskal-Wallis法检测病毒唑和GX-2在不同浓度不同时间对呼吸道合胞病毒的抑制作用、对呼吸道合胞病毒的穿入的抑制作用以及其对呼吸道合胞病毒的直接抑制作用。实验数据均采用spss软件13.0进行统计分析。
结果:以抗呼吸道合胞病毒活性作用为导向,以化学分离方法,从甘草中分离得到抗呼吸道合胞病毒有效成分GX-2,GX-2初步鉴定为甘草黄酮类化合物。GX-2对Hela细胞的半数中毒浓度(TC50)为401.89μg/ml,对呼吸道合胞病毒的半数有效剂量(EC50)为26.87μg/ml,治疗指数(TI)为14.96。GX的抗呼吸道合胞病毒的机制是多方面的:GX-2不仅可以抑制病毒的复制而且可以抑制病毒的吸附、穿入。在RSV感染Hela细胞至少8h内给药,对RSV复制均有明显的抑制作用(p<0.01);GX-2可以直接抑制RSV(p<0.01)。
结论:本研究结果表明,甘草抗病毒有效成分GX-2是非甘草酸或甘草多糖物质,是甘草黄酮类化合物。在体外对RSV致细胞病变有明显的抑制作用,其作用机制应是多方面的,本研究为开发研制新型防治RSV的药物提供了可靠的依据。
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