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目的:通过免疫组化染色观察USP25在乳腺癌组织中的表达、shRNA-USP25慢病毒阻低USP25的表达后乳腺癌细胞MCF-7生物学行为改变和UBE3A与USPs的可能关系,以探讨USP25在乳腺癌中的作用及其机制。方法:采用50例乳腺癌组织及癌旁相对正常组织石蜡标本,通过免疫组织化学染色检测USP25的表达情况并分析USP25与临床病理特征的关系;shRNA-USP25慢病毒转染乳腺癌MCF-7细胞,通过荧光定量PCR与Western blotting检测USP25基因及蛋白阻低水平并筛选出干扰效率最高的慢病毒;CCK8试剂盒法检测阻低USP25后细胞增殖能力,Transwell侵袭实验检测阻低USP25后细胞侵袭能力,流式细胞术检测阻低USP25后细胞凋亡;最后通过阻低UBE3A后USP25的表达水平、转录组测序和基因表达谱技术、USP25生物信息学分析等研究USP25在乳腺癌中的作用机制。结果:乳腺癌组织中,USP25阳性表达率为72%(36/50),而邻近相对正常组织中均为阴性表达,两者差异具有统计学意义(P=0.000),且USP25的表达与组织学分级(P=0.046)、淋巴结转移(P=0.041)、Ki-67的表达(P=0.029)相关;shRNA-USP25慢病毒阻低USP25的表达后,阻低组KD1组中USP25蛋白的表达降低最明显,敲减效率最高,为最佳干扰片段(P=0.0000014),USP25 mRNA的表达也降低最明显(P=0.0000015);CCK8实验显示阻低USP25后MCF-7细胞增殖能力受到抑制(P<0.001);Transwell实验显示阻低USP25后细胞侵袭能力明显降低(P=0.000045);流式细胞术显示阻低USP25后细胞明显凋亡(P=0.0000021);阻低UBE3A后USP25的蛋白及mRNA的表达均明显降低(P=0.00000069,P=0.00000070),转录组测序和表达谱技术显示乳腺癌细胞中阻低UBE3A后USP家族差异基因多达50余个,KEGG数据库中USP25生物信息学分析显示USP25参与IL-17 signaling pathway相关通路,从而影响乳腺癌的发生发展。结论:USP25在乳腺癌组织中高表达,且影响乳腺癌细胞的增殖,浸润、转移和凋亡,USP25可能在乳腺癌的发生和发展中扮演着重要角色,其机制可能与UBE3A有密切关系。