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沙门氏菌（Salmonella）是一种重要的人畜共患病原菌，广泛地存在于人类、畜禽、宠物、各种食物等。宠物犬误食被沙门氏菌污染的饲料后而引起感染，在与人类密切接触的过程中，易将沙门氏菌传染给人类。同时，人类在喂食犬时，也可以因直接接触被污染的饲料而感染沙门氏菌，从而不断扩大沙门氏菌的传播范围。宠物犬和犬粮作为沙门氏菌的贮藏宿主，在沙门氏菌的散播及其对人类的影响方面扮演着重要的角色。为了解合肥市宠物犬和犬粮携带沙门氏菌情况，分离菌株的药物敏感性和耐药基因携带情况，及耐药基因mRNA的表达水平，本研究采集746份宠物犬肛棉拭子和404份犬粮样品，利用PCR与常规技术相结合的方法进行沙门氏菌的分离鉴定，分别采用凝集实验和K-B纸片扩散法确定分离菌株的血清型和耐药表型，用PCR方法检测耐药基因，同时结合表型确证实验鉴定产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株；利用SYBR Green I染料法建立flor基因和sul2基因实时荧光定量PCR（Real Time PCR）检测方法，并用Real Time PCR方法分别对不同菌株flor基因和sul2基因的mRNA表达量进行测定和分析。结果显示，宠物犬犬肛棉拭子样品中共分离沙门氏菌19株，阳性率为2.55%（19/746），肠炎沙门氏菌为优势血清型；犬粮样品中分离沙门氏菌10株，阳性率为2.48%（10/404），德尔卑沙门氏菌为主要的优势血清型。在对20种抗生素的感受性试验中，29株沙门氏菌对阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林耐药性最强，而对头孢西丁和磷霉素最敏感。具有多重耐药性的菌株占分离菌株的31.03%，多重耐药谱为AMC-AMP-SXT-DOX。共检测出16种耐药基因，其中以strA-B基因的检出率最高，检出率为37.93%；其次是blaPSE基因，检出率为34.48%。结合表型确证试验，鉴定出6株产ESBLs菌株。成功建立了flor基因和sul2基因SYBR Green I荧光定量PCR检测方法，最低检测限度分别为102copies/μL和103copies/μL。对氟苯尼考耐药的菌株S8、S10、G8、G17、G19的flor基因表达水平均高于中敏菌株S7；对复方新诺明耐药的菌株S10、G8、G17、G19的sul2基因表达水平均高于敏感菌株G6和G15。本研究表明，合肥市宠物犬和犬粮中不同程度的携带沙门氏菌，分离菌株耐药性严重，且出现了产ESBLs菌株；建立的荧光定量PCR方法重复性好，特异性高，具有快速、灵敏的特点，可替代普通PCR方法来进行耐药基因的检测；耐药基因的转录表达与耐药水平呈正相关。