目的:
　　检测4例隐性营养不良型大疱性表皮松解症患者COL7A1基因突变位点。
　　方法:
　　1.提取各位患者及相关亲属外周血DNA，采用PCR方法扩增COL7A1基因外显子及其侧翼序列并测序筛查突变位点；
　　2.中华-8芯片分析第四例患者及其父母3号染色体COL7A1基因所在片段SNP位点；
　　3.多重连接探针扩增技术检测第四例患者及其父母COL7A1基因拷贝数；
　　4.行体外实验，通过RT-PCR预测第四例患者的纯合剪切位点突变对COL7A1基因剪接产生的影响。
　　结果:
　　1.突变检测结果：4例患者共有6个突变位点，包括2个错义突变(p.P2232L与p.G1531E)，2个无义突变(p.R2492*与p.R2777*)和2个剪切位点突变(dsIVS6+2T＞C及dsIVS53+5G＞C)，其中p.P2232L、p.G1531E、dsIVS6+2T＞C及dsIVS53+5G＞C这四个突变位点未曾报导。200例健康对照未发现此突变。前三例患者的健康父母为相应突变的杂合携带者，而第四例患者的健康父亲为其纯合突变位点的杂合携带者，但母亲未携带此点突变。
　　2.芯片分析结果：第四例患者SNP位点系来自于父母双方；患者约364kb大小染色体区域为纯合状态，而除此区域仍为杂合状态。
　　3.多重连接探针扩增技术检测结果：第四例患者COL7A1基因呈半合子状态。
　　4.RT-PCR结果：PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳并置于凝胶成像仪系统分析示突变型包含235bp的一个条带，野生型包含235bp和280bp的两个条带，空质粒对照为235bp的一个条带。
　　结论:
　　1.这些突变位点可能参与引起患者相应的临床表现；
　　2.第四例患者因其COL7A1基因的半合子状态合并dsIVS53+5G＞C而出现表型。