目的:研究大肠息肉和大肠腺瘤患者手术标本中巨噬细胞比例变化与大肠癌疾病进程的临床意义,挖掘肿瘤相关巨噬细胞（Tumor associated macrophages,TAMs）在疾病演变过程中的生物学机制。研究云南藤黄乙醇标准提取物（YTE-17）对大肠癌的预防作用;研究在大肠癌发生的过程中,YTE-17对巨噬细胞极化的调节作用。并通过体内外研究,探讨在巨噬细胞被清除的条件下,YTE-17抑制大肠癌发生的分子机制,为拓展YTE-17的临床应用提供理论依据。方法:1.通过免疫组化分析CD68、CD163两种代表不同巨噬细胞分型的蛋白的表达情况,探讨在大肠息肉和大肠腺瘤组织中M1型和M2型巨噬细胞差异性,分析巨噬细胞不同分型与大肠肿瘤临床病理特征之间的相关性。2.通过AOM/DSS方式建立小鼠自发原位大肠癌模型和APCMin/+基因突变的肠道腺瘤小鼠,同时给与YTE-17灌胃12周,期间观察并记录小鼠一般情况,包括活动度、体重、大便情况以及生存率等。治疗结束后,计数肠道腺瘤的数目,收集肿瘤标本,进行包埋切片、病理分析等进行统计分析。3.通过免疫组化法检测肠道肿瘤组织中Ki67、PCNA、c-Myc的表达,用Brd U标记肠腺瘤增殖细胞,PCR技术检测肿瘤相关基因的m RNA水平变化。采用Ray Biotech血清蛋白芯片分析小鼠外周血中免疫相关因子表达变化;流式细胞技术研究小鼠肠道肿瘤组织中M1型和M2型巨噬细胞差异性及特异性分子标识的表达,Elisa方法分析肿瘤组织中免疫因子IL-6,IL-10,IL-12,TGF-β等的分泌。4.采用CEL腹腔注射的方式清除APCMin/+小鼠体内巨噬细胞,观察巨噬细胞对APCMin/+小鼠肠道肿瘤的影响和恶性转化的调控作用;流式细胞技术分析肿瘤组织内巨噬细胞M1型和M2型的转化情况,免疫组化技术和Elisa技术分析巨噬细胞特异性分子标识F4/80、CD206的表达情况。5.体外将RAW264.7细胞被诱导为M2型后,给与YTE-17干预,观察巨噬细胞活性的影响;并且将处理过的M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养,通过Transwell小室的方式,观察M2型巨噬细胞对肿瘤细胞增殖和侵袭的影响。结果:1.大肠息肉标本中CD68的比例高于CD163,大肠腺瘤标本中CD163的比例高于CD68;大肠腺瘤中STAT3、JNK、ERK等信号通路中关键蛋白磷酸化明显,提示M2型巨噬细胞在大肠腺瘤中居多,与大肠癌疾病进展相关。2.与AOM/DSS和/或者APCMin/+模型组小鼠比较,小肠腺瘤数、大肠腺瘤数均显著减少（P＜0.01）。病理结果显示,模型组小鼠的大肠部位出现原位癌,小肠部位出现典型的腺癌伴局部黏膜下侵犯;YTE-17组小鼠大肠未见原位癌,小肠则为高级别腺瘤多见,肿瘤细胞核变情况好转。IHC结果显示,与模型组比较,Ki67、PCNA和Brd U蛋白阳性表达率明显降低（P＜0.01）。3.与对照组比较,YTE-17治疗组小鼠肠道组织中的巨噬细胞CD206的比例下调,M2型巨噬细胞相关蛋白Arg-1、IL-10、TGFβ等表达下调,而i NOS、IL-12的表达上调（P＜0.01）。4.与对照组相比,CEL组小鼠体内巨噬细胞显著减少;小鼠肠道肿瘤的数目、大小和恶性程度也明显下降。与CEL组相比,YTE-17+CEL组的肠道肿瘤的数目、大小变化不明显,Arg-1、i NOS、CD206的变化也不明显,提示YTE-17对大肠癌的预防作用是依赖巨噬细胞的。5.体外实验结果显示,M2型巨噬细胞能够促进肿瘤细胞的增殖和侵袭,但是在经过YTE-17处理后,M2型巨噬细胞向M1型转变,抑制了M2型巨噬细胞内STAT3、JNK、ERK等信号通路的激活。并且经过YTE-17处理的M2型巨噬细胞能够阻止M2型巨噬细胞对肿瘤细胞的促增殖作用。结论:1从大肠息肉、大肠腺瘤癌患者手术标本中发现肿瘤浸润性巨噬细胞（M2型巨噬细胞）与大肠癌的发生密切相关,TAM中STAT3、JNK、ERK等信号通路的激活与大肠肿瘤的恶性程度存在正向调节作用。2 YTE-17能够明显减少大肠癌化学诱导小鼠和肠道自发肿瘤小鼠的肿瘤数目、大小、恶性程度,及肿瘤组织中Brd U、PCNA、Ki67的表达,具有预防肠道肿瘤的发生发展的作用。3 YTE-17通过降低STAT3、JNK、ERK等信号通路的关键蛋白的磷酸化,促进M2型巨噬细胞向M1型的转化,恢复肠道免疫细胞功能,抑制肠道肿瘤的形成。体内外实验提示YTE-17可能是通过促进M2型巨噬细胞向M1型的转化预防大肠癌发生。