【摘 要】
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目的探讨先天性HCMV感染大鼠海马区突触素Ⅰ(Synapsin I)表达的改变,及其对学习与记忆的影响,为进一步研究先天性HCMV感染对大鼠海马学习记忆的损伤提供科学的实验依据。方法运
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目的探讨先天性HCMV感染大鼠海马区突触素Ⅰ(Synapsin I)表达的改变,及其对学习与记忆的影响,为进一步研究先天性HCMV感染对大鼠海马学习记忆的损伤提供科学的实验依据。方法运用HCMV致细胞病变效应(CPE)+++~++++ (75%以上)的病毒悬液在HEFL细胞上滴定TCID50(5×104 /ml)接种第5代HELF细胞,取8-9周龄SPF级SD大鼠40只,按雌∶雄=3∶1配对,将见栓孕鼠随机分为实验组和对照组,每组15只,在见栓后第5天分别腹腔内接种病毒悬液1ml/只,对照组同期分别接种等量的HELF细胞上清液。子代动物长成到30-40天,分离海马组织。采用HE染色观察先天性HCMV感染大鼠海马神经细胞的形态学改变;免疫组化方法观察突触素Ⅰ在先天性HCMV感染大鼠海马区中的分布特点;同时运用Western Blot检测子代大鼠突触素Ⅰ蛋白的表达水平,应用SPSS 11.5统计软件,采用t检验进行比较。结果①接种病毒的HELF细胞在感染后第2天即可观察到特征性CPE,随着时间的延长,第5天95%的细胞裂解液化消失;②HE染色于20倍电镜下可见海马区细胞数显著减少,空泡变性明显,细胞排列紊乱;③光镜下免疫组织化学可见棕黄色颗粒,为表达先天性感染的仔鼠海马DG区突触素I免疫反应阳性产物,通过图象分析仪测突触素I阳性产物的平均光密度值(AOD),感染组AOD为0.172±0.070,对照组为0.295±0.047,采用t检验比较,P<0.01表示两组差异有显著性;④Quantity One分析软件对感染组和对照组的仔鼠海马区突触素ⅠWestern Blot条带的灰度值进行测定,应用SPSS 11.5统计软件,采用t检验比较两组的差异,先天性感染组子代大鼠海马突触素Ⅰ的表达明显低于对照组(P<0.01),免疫组化与Western Blot结果显示一致。结论孕早期人巨细胞病毒感染可使子代大鼠海马区突触素I表达明显降低,提示先天性HCMV感染与海马区突触素Ⅰ表达水平和学习记忆障碍之间有一定的相关性。
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