粗毛栓菌复方饲料添加剂原料中试发酵及其免疫活性研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:seayi
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
粗毛栓菌(也被称为硬毛粗盖孔菌)Trametestrogii(Berk.)Bondartsev&Singer(=Funaliatrogii(Berk.)Bondartsev&Singer),隶属于担子菌门Basidiomycota,蘑菇纲Agaricomycetes,多孔菌目Polyporales,多孔菌科Polyporaceae,栓菌属Trametes。其不仅含有多种化学成分,还有抗肿瘤,增强免疫的功效。本文通过查阅大量文献,在团队前期研究基础上首先对粗毛栓菌菌种进行中试固体发酵,并与粗毛栓菌子实体的增强免疫与抗氧化活性进行对比;对粗毛栓菌复方饲料添加剂进行安全性评价实验;通过紫外-分光光度法测定,测定了粗毛栓菌复方饲料添加剂中多糖、总黄酮含量,采用试剂盒检测了黄曲霉素的含量;研究了粗毛栓菌复方饲料添加剂对西门塔尔公牛的体重及生化指标的影响。具体内容如下:
  综述部分,通过查阅国内外文献资料,对中药及菌物药在饲料添加剂中的应用研究进展进行了整理、分析和综述,并提出了存在的科学问题和建议。
  粗毛栓菌中试固体发酵研究:首先对粗毛栓菌菌种进行了分子鉴定,确定所用实验菌种为粗毛栓菌;对菌种进行扩繁,按比例配制1000余袋发酵袋料后,接种,经28天获得中试级粗毛栓菌固体发酵物。
  粗毛栓菌子实体与发酵物的增强免疫及抗氧化活性对比:采用小鼠体内实验法对粗毛栓菌子实体与发酵产物的增强免疫和抗氧化活性进行研究,结果表明粗毛栓菌子实体不同极性提取物和固体发酵物水提取物均能明显促进免疫器官指数的增长,能显著提高免疫细胞因子白介素4(IL-4)、白介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和免疫球蛋白A(IgA)的含量。子实体水提物高、中剂量组,发酵物高、低剂量组还能增强小鼠血清溶血素含量,但两种提取物无显著差异。通过HE及免疫组化切片观察,结果显示子实体水提取物高剂量组和发酵物水提取物高剂量小鼠的胸腺、脾脏细胞数量显著高于空白组和模型组,细胞形态完整。子实体提取物和发酵物均能降低MDA的含量,使T-AOC、SOD的含量显著上升。肝脏细胞中,模型组肝细胞间液较多,细胞零散分布。而给药组细胞数量较多,尤其发酵物水提取物高剂量组细胞分布均匀,细胞核较大且完整。以上实验结果证明,粗毛栓菌子实体和固体发酵物的水提取物均能更好地改善小鼠的免疫能力和抗氧化活性,但两种水提取物无明显差异。
  粗毛栓菌复方饲料添加剂的配伍及安全性评价研究:首先在团队前期研究基础和中医药理论指导下对粗毛栓菌复方饲料添加剂的处方进行优化,最终确定其处方为粗毛栓菌固体发酵物∶黄芪∶甘草=(2∶1∶1);随后利用该复方添加剂进行小鼠急性毒性试验,连续观察10天,小鼠行为活动正常,无死亡;经过30天的蓄积毒性试验,结果显示小鼠的器官指数无显著性变化,肝、肾功能生化指标与空白组相比无明显改变,各器官HE切片均无病变。实验结果证明粗毛栓菌复方饲料添加剂大剂量或长期使用均不能造成小鼠脏器损伤,为无毒性。
  粗毛栓菌复方饲料添加剂的成分含量测定:通过对粗毛栓菌复方饲料添加剂中粗多糖、总黄酮及黄曲霉素含量测定,确定了该添加剂中粗多糖含量为12.5%;乙醇提取物和水提取物的总黄酮含量分别为5.95%和1.01%;粗毛栓菌的子实体、固体发酵物和制得的饲料添加剂中黄曲霉素含量分别为0μg/kg、0μg/kg和0.09~0.22μg/kg。本研究为粗毛栓菌复方饲料添加剂增强动物机体免疫功能的药理活性机制的研究进行了初步的探索,也为该添加剂质量标准建立提供佐证。
  粗毛栓菌复方饲料添加剂对牛的体重和生化指标的影响:在西门塔尔公牛的日粮按比例加入粗毛栓菌复方饲料添加剂后,试验组牛的体重明显提高,血液生化指标UREA、TCHE、TG均有所降低,GLU和TP含量显著提高;对IgA、IgG、IFN-γ、IL-2、IL-4五个免疫指标进行检测,结果与空白组相比均有不同程度的提高;试验牛的日增重比空白组增长了52.97%,饲料转化率比空白组提高了34.59%,而且3%剂量组的料重比最低,经济效益最好。因此,在使用该饲料添加剂时比例不宜过高,添加量应控制在3%左右为宜。
  结论,粗毛栓菌子实体水提取物及发酵产物均可改善小鼠免疫能力,提高抗氧化能力,但固体发酵物作用优于子实体各提取物;粗毛栓菌复方饲料添加剂能显著增加西门塔尔公牛体重,提高免疫力,为体外探索粗毛栓菌复方饲料添加剂免疫增强机制提供借鉴。
其他文献
目的:建立干燥综合征(Sj(O)grens syndrome SS)动物模型,观察清燥布津法对SS小鼠模型下颌腺aquaporin-5(AQP)表达的影响.方法:雌性BALB/c小鼠颌下腺匀浆离心后的上清液加弗氏完全佐剂(CFA)制成乳化免疫抗原,采用多点注射法免疫同系鼠,同时注射白百破疫苗建立SS小鼠模型.以环戊硫酮为对照组,观察中药对SS小鼠模型唾液分泌、病理及下颌腺AQP(免疫组化法)表达的
大血藤为木通科植物大血藤Sargentodoxa cuneata(Oliv.)Rehd.et Wils.的干燥藤茎。大血藤化学成分丰富,主要为酚类、蒽醌、黄酮类、皂苷类等化合物。现代研究发现,其主要药理活性有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗菌等。课题组前期研究发现大血藤能有效抑制炎性骨破坏。本研究在前期课题组研究的基础上,建立大血藤不同浓度乙醇提取物指纹图谱及大血藤总酚指纹图谱,联合大血藤总酚指纹图谱信息
学位
莪术醇是莪术油中的主要活性成分之一,具有广泛的药理活性,如抗肿瘤,抗菌等。本论文主要针对莪术油中的倍半萜类化学成分进行分离鉴定,并以分离得到的莪术醇为原料进行结构优化制备系列衍生物,以期发现具有研究价值的活性化合物。我们通过研究主要取得以下结果:  1、从莪术油中共计分离得到9个已知的倍半萜类化合物,分别为异牻牛儿呋内酯、4-epicurcumol、5βH-elem-1,3,7,8-tetraen
学位
【目的】  1.研究高糖对MG63细胞成骨分化的抑制作用。  2.探讨HIF1A-AS1在高糖抑制MG63细胞成骨分化中的作用及机制。  【方法】  1.MTT法检测高糖对人成骨肉瘤MG63细胞体外增殖的影响。分组:25mM糖浓度(对照组)、50mM糖浓度组、75mM糖浓度组、100mM糖浓度组、125mM糖浓度组、150mM糖浓度组。不同糖浓度条件下培养细胞1天、3天、5天、7天后检测各组细胞活
【目的】  1.本课题拟构建一种具有叶酸靶向性能的金属-有机骨架共载药体系,首先通过溶剂热法合成金属-有机骨架UiO-67-(NH2)2(UiO=UniversityofOslo),然后将5-羧基荧光素(5-FAM )修饰于其表面,制备出荧光素功能化材料UiO-67-(NH)2-FAM;选取抗癌药物5-氟尿嘧啶(5-FU)和多靶点叶酸拮抗剂培美曲塞(PMT)分别负载于UiO-67-(NH)2-FA
【目的】  1.制备包裹白介素12(IL-12)的还原响应性白蛋白纳米颗粒(INS),采用生物正交反应(Bioorthogonal reaction)偶联策略,研制一种免疫刺激剂工程化的CART细胞(INS-CAR T),对其进行理化性质表征。  2.对INS-CART细胞进行体外细胞学实验,考察INS-CART细胞抗原触发还原响应释放药物的特性,以及IL-12从INS中响应释放后对CART细胞功
【目的】  1.制备包裹吲哚菁绿(Indocyanine green,ICG)的磷脂聚合物纳米光敏剂(INPs),并通过迈克尔加成反应共价偶联方式将趋磁细菌AMB-1与纳米光敏剂INPs偶联形成AMB-1-INPs微纳机器人,对其进行理化表征。  2.通过AMB-1-INPs微纳机器人溶液进行体外趋化性与运动性实验,探讨AMB-1-INPs微纳机器人的磁靶向和厌氧靶向的性质,并考察在外磁场的操控下
痛风(Gout)的特征是高尿酸血症和关节内尿酸单钠(MSU)结晶,不及时治疗的话,会导致慢性炎症并伴有不同程度的关节变性。目前,尽管常用的痛风药具有一定的疗效,但它们会引起一系列副作用,例如毒性和胃肠道反应。因此迫切需要开发安全、有效的药物来治疗痛风。相对于目前市场上毒副作用较大的化学合成类药物而言,天然药物在治疗痛风中起到越来越重要的作用。青风藤为防己科植物青藤Sinomeniumacutum(
人参内生多黏类芽孢杆菌是具有广谱的生物防治作用。因此,通过人参发根与多黏类芽孢杆菌互作研究,从而提高多黏类芽孢杆菌数量、生理特性及抑菌活性,对提高其生防作用具有重要意义。因此本研究,首先,以多黏类芽孢杆菌芽孢数、活菌数、生物膜为评价指标,探究人参发根与多黏类芽孢杆菌互作对菌株生理特性的影响;其次,应用滤纸片扩散方法,探究人参发根与多黏类芽孢杆菌互作对菌株抑菌活性的影响;再次,分离多黏类芽孢杆菌抑菌
人参皂苷是人参道地性的物质基础。具有多种生理和药理功能,广泛应用于医药、保健品、化妆品、食品和生物农药等领域。但由于人参皂苷含量低,尤其是稀有人参皂苷含量更低,限制了人参的应用与开发。针对人参内生菌“协同效应”促进“防御反应”产物皂苷累积分子机制问题。本文首先,研究多黏类芽孢杆菌与人参发根互作对人参发根生长、共培培养基(糖、酸碱度)及其定殖的影响;其次,研究多黏类芽孢杆菌与人参发根互作对人参发根蛋
学位