Caspase-3家族是细胞凋亡的关键因子，它的异常活化将导致细胞的过度凋亡并引起神经退行性疾病和心血管疾病等多种疾病。靛红类衍生物具有多种生物活性，是药学研究中比较热门的一类化合物。本课题拟建立caspase-3的原核表达体系，利用纯化得到的caspase-3蛋白建立体外激酶抑制活性筛选体系，并以实验室前期介成的38个吲哚类衍生物为研究对象，测试它们的caspase-3抑制活性并分析其构效关系。首先，本论文成功建立了人源caspase-3的原核表达体系。实验结果显示;重组质粒pET-21b/Caspase-3在BL21(DE3)Plyss大肠杆菌中经1mMTPTG在16℃诱导5 h能够表达可溶性:caspase-3同的蛋白;经过Ni柱纯化和咪唑洗脱得到重组蛋白caspase-3。其次，利用纯化的caspase-3构建了体外caspase-3激酶活性测试平台，我们确定了最佳的caspase-3体外活性测试条件为:底物Ac-DEVE-AMC浓度0.05mM、caspase-3终浓度5ng/mL、反应时间3h、反应温度25℃。最后，靛红类衍生物的caspase-3抑制活性测试结果和构效关系分析表明：母核的靛红对caspase-3的抑制作用很弱，其IC50值>100μM。实验室前期合成的38个靛红类衍生物中caspase-3抑制活性的IC50值<1μM的有7个,其中C-5位上引入苯环的HKL-2-1-7和C-5位上引入硝基的LFX-A021-133-01对caspase-3的抑制活性最好，其lC50值分别为0.29μM和0.38比靛红分別提高了345倍和263倍。这一结果提示:在对靛红进行结构修饰时，C-5位引入相对空间结构较大的取代基或强吸电子基团可以显著提高caspase-3抑制活性。这为今后的结构改造提供了极好的提示。综上，本课题建立了caspase-3的表达、纯化及激酶测试体系，并研究了靛红类衍生物的体外caspase-3激酶抑制活性和构效关系。本论文的实验结果为后续以caspase-3为靶点的抑制剂研究提供了良好的实验基础。