【摘 要】
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目的明确MICAL-L2在乳腺癌组织中的表达水平,并探讨MICAL-L2在乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭过程中的作用并分析其潜在的分子机制。方法1.应用免疫组织化学方法检测人乳腺癌组织与癌旁组织中MICAL-L2蛋白表达水平,并分析MICAL-L2与人乳腺癌临床病理因素之间的关系。2.构建稳定沉默MICAL-L2的人乳腺癌细胞株,利用CCK8实验与软琼脂克隆形成实验、细胞划痕实验或Transwell侵
【基金项目】
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国家自然科学基金:Mafb在CD8+T细胞中调控IL-10的转录及其功能研究（项目批准号:82071755）；
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目的明确MICAL-L2在乳腺癌组织中的表达水平,并探讨MICAL-L2在乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭过程中的作用并分析其潜在的分子机制。方法1.应用免疫组织化学方法检测人乳腺癌组织与癌旁组织中MICAL-L2蛋白表达水平,并分析MICAL-L2与人乳腺癌临床病理因素之间的关系。2.构建稳定沉默MICAL-L2的人乳腺癌细胞株,利用CCK8实验与软琼脂克隆形成实验、细胞划痕实验或Transwell侵袭实验,分别检测MICAL-L2对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响;另外,通过裸鼠荷瘤实验,进一步从体内实验角度明确MICAL-L2对乳腺癌细胞增殖的影响。3.采用Western Blot检测稳定沉默MICAL-L2及对照细胞中EMT相关分子标志物（E-cadherin、Vimentin）蛋白水平。4.RNAseq分析稳定沉默MICAL-L2及对照细胞全基因转录组水平。结果1.免疫组织化学染色结果显示:与癌旁组织相比,MICAL-L2在乳腺癌组织中的表达水平显著升高（P＜0.05）;MICAL-L2在病理分级Ⅱ-Ⅲ/Ⅲ期中的表达率（68.85%）显著高于I-Ⅱ/Ⅱ期中的表达率（33.33%）（P=0.038）;在TNM分期中,Ⅱ-Ⅲ/Ⅲ期中的表达率（81.82%）显著高于Ⅱ期中的表达率（56.86%）（P=0.041）。2.体外实验结果显示:与对照组细胞相比,沉默MICAL-L2能显著抑制乳腺癌细胞的增殖（P＜0.010）,并且对乳腺癌细胞的迁移有明显抑制作用（P＜0.001）,同样对乳腺癌细胞侵袭也有显著抑制作用（P＜0.05）。裸鼠荷瘤实验结果显示:沉默MICAL-L2可在体内抑制乳腺癌细胞的增殖。3.Western Blot结果显示:与对照组细胞相比,沉默MICAL-L2细胞中上皮分子标志物E-cadherin表达水平升高,相反,间质分子标志物Vimentin表达下降。4.RNAseq分析结果显示:发现1317个差异基因,包括887个上调基因和430下调基因,这些差异基因显著富集在氧化磷酸化、谷胱甘肽代谢等生物学过程。结论1.MICAL-L2在乳腺癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织,MICAL-L2蛋白表达水平与病理分级、TNM分期呈显著正相关。2.MICAL-L2促进乳腺癌细胞体外增殖和体内肿瘤生长、迁移和侵袭生物学过程。3.MICAL-L2促进乳腺癌细胞的EMT转化进程。4.MICAL-L2可能与氧化磷酸化、谷胱甘肽代谢等生物学过程有关,进而对乳腺癌细胞恶性生物学行为（增殖、迁移、侵袭）和EMT进行调控。
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