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目的:通过体外培养KATOⅢ人胃硬癌细胞株,同时利用不同的热疗温度处理KATOⅢ胃硬癌细胞株,模拟肿瘤热疗(41℃-43℃)环境,分别观察在37℃、40℃、41℃、42℃、43℃的环境以及有无曲尼司特作用下,癌细胞的增生及细胞中TGF-β mRNA表达水平的变化,从而为热疗及曲尼司特治疗胃硬癌寻找到更具针对性的实验依据和临床治疗提供新的思路。方法:取10块无菌塑料6孔板分为实验组和对照组,每组各5块孔板,并在每组孔板盖上依次标明37℃、40℃、41℃、42℃和43℃,然后将KATOⅢ人胃硬癌细胞悬液按照2.0 mL/孔,5.0×10 4 cell/mL的密度分别接种10块6孔板上的规定孔中,按照(2单位体积细胞液:1单位体积曲尼司特)比例分别在实验组孔板中加入1mL浓度为1.0mmol/L的Tranilast(曲尼司特)溶液,对照组分别加入1mL IMDM完全培养液,分别置于37℃、40℃、41℃、42℃和43℃,体积分数为0.05%的CO2培养箱中培养6小时后。最后分别采用Luna细胞计数器和RT-PCR法检测KATOⅢ人胃硬癌细胞在有无曲尼司特干预下不同温度培养时增殖情况和TGF-β mRNA的表达变化,每组实验数据均为同一检测方法测得3次数值后所取得平均值,用均数±标准差(X±S)来表示实验数据,采用SPSS 17.0统计学软件分析数据,在进行正态性以及方差齐性检验后,最后采用单因素方差分析方法,分别对37℃、40℃、41℃、42℃和43℃不同温度下测得的实验数据进行横向和纵向对比分析。结果:(1)实验组:在37℃、40℃、41℃、42℃和43℃不同温度和Tranilast(曲尼司特)联合作用下,使用Luna细胞计数器测得各孔板细胞均数为 7.13±0.05×105 cell/mL、5.33±0.12 ×105 cell/mL、3.70±0.02×105 cell/mL、2.28±0.04X 105 cell/mL、1.13±0.06×105 cell/mL;RT-PCR 法测得 TGF-β mRNA相对表达量分别为 0.66±0.02、0.51±0.02、0.31±0.01、0.22±0.01、0.10±0.02。(2)对照组:在37℃、40℃、41℃、42℃和43℃不同温度作用下,Luna细胞计数器测得各孔板细胞均数为9.20±0.17 × 105 cell/mL、6.19±0.06 ×105 cell/mL,4.08±0.05 X 105 cell/mL,3.13±0.12 ×105 cell/mL,2.18±0.04 ×105 cell/mL,RT-PCR 法测得 TGF-β mRNA 相对表达量分别为 0.85±0.03、0.63±0.02、0.40±0.02、0.31±0.02、0.23±0.01。(3)通过横向对比分析同一温度下实验组和对照组细胞数目和TGF-β mRNA表达量发现:每个温度下的实验组中细胞数目和TGF-β mRNA相对表达量均较对照组要低(P<0.05),差异具有统计学意义。(4)通过纵向对比37℃、40℃、41℃、42℃和43℃不同温度下对照组的细胞数目和TGF-β mRNA表达量发现:随着温度的升高,对照组的细胞数目和TGF-β mRNA相对表达量均逐渐降低,并且在43℃时细胞数目和TGF-β表达量均达到最低值,差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)通过综合分析实验组和对照组在不同温度下的细胞数目和TGF-β mRNA表达量发现:随着温度的升高,实验组和对照组的KATOⅢ细胞数目和TGF-β mRNA相对表达量均呈逐渐降低趋势,并且在43℃时细胞数目和TGF-β表达量均达到最低值,差异具有统计学意义(P<0.05),并且加入曲尼司特后的实验组中各温度下的细胞数和TGF-β mRNA表达量均较同温度下的对照组要低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.曲尼司特具有抑制KATOⅢ胃硬癌细胞生长和TGF-β表达的作用。2.控温(40℃-43℃)可抑制KATOⅢ胃硬癌细胞生长和TGF-β表达,并且43℃为其最适热疗温度。3.控温(40℃-43℃)联合曲尼司特和控温分别作用KATOⅢ胃硬癌细胞时,前者在抑制KATOⅢ胃硬癌细胞生长和降低TGF-β表达作用方面均要更显著,并且43℃为其最适热疗温度。