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[摘 要]这里所说的谷丙甘氨酸胶囊，是一种应用于男性前列腺增生疾病中药物，在治疗男性尿频，以及排尿不畅方面疗效显著，这种胶囊属于复方制剂，其成分有三种，分别为：谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸。文章主要阐述的就是利用HPLC检测法来对这种药物的三种成分含量进行测定。目的就是为了确定谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸在谷丙甘氨酸胶囊中的具体含量值，实验顺利测得了以上三种成分的具体含量，并证明HPLC检测法是一种操作简便快捷，测量结果准确的测量法，适用于谷丙甘氨酸胶囊中3组分含量的测定。
[关键词]HPLC法；谷丙甘氨酸胶囊；含量
中图分类号：P22 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）31-0375-01
引言
男性前列腺疾病比较常见，并给患者的日常生活带来了諸多不便，谷丙甘氨酸胶囊是治疗那行排尿方便的药物，效果比较明显，而HPLC检测法是利用色谱理论对谷丙甘氨酸胶囊进行成分测定的一种方法，文章首先将这种方法进行了简单的分析，进而对HPLC法测定谷丙甘氨酸胶囊中3组分含量的具体步骤进行了分析和研究。
一、HPLC检测法
色谱理论：色谱法的分离原理是溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相之间的相互作用的大小、强弱不同，样品各组分在固定相与流动相中的溶解各不相同，从而经过固定相时的滞留时间不同，先后从固定相中流出时间各不相同。高效液相色谱法是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法
二、仪器与方法
1.仪器：试验所采用的是高效液相色谱仪，它的产地为日本，然后还有电子天平（METTLERAE-240），用来选取药物，确定药物剂量。
2.方法：使用高效液相色谱仪进行测量的方法，叫做高效液相色谱法，通常人们也叫它为高压液相色谱、高速液相色谱以及、近代柱色谱等。这中药剂成分测定法是建立在色谱法基础之上的，以液体作为流动相，利用高压输液系统实现对溶剂检测的。它在单一溶剂以及混合溶剂中均适用，并且在很多领域已经得到了应用，例如：化工、医学、法医检测等，是一项非常重要的分离、分析技术。
三、步骤与结果
1.试验材料
谷丙甘氨酸胶囊，产地为哈药集团制药总厂；谷氨酸对照品，丙氨酸对照品；甘氨酸对照品；2，4-二硝基氟苯；乙腈。
2.试验步骤
2.1色谱条件
采用十八烷基硅烷键合硅胶柱（SGEODS-2250H4.6mm5μmSN：E05-081），0.05mol/L的醋酸钠缓冲液（pH6.4）：乙腈：水（70：15：5）为流动相，流速为1.0mL/min，进样20μL，检测波长362nm，按外标法以峰面积计算。
2.2溶液的配制
2.2.1对照品溶液的制备
进行精密称定药品时，我们选用的谷氨酸对照品为22mg、丙氨酸对照品8mg、甘氨酸对照品4mg，然后将其装入100mL的量瓶中，倒入0.1mol/L的盐酸对这些药品进行溶解、稀释，溶剂和稀释的过程中要定量进行，直到刻度为止，精密量取10mL置100mL量瓶中，加0.5mol/L的碳酸氢钠溶液（pH9.0）10mL，加1%，2，4-二硝基氟苯乙腈溶液3mL，摇匀，置60℃水浴中暗处加热60min后取出，放冷至室温，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀。
2.2.2供试品溶液的制备
进行试品溶液制备的时候，我们首先要去药品20粒，然后取出其内部的药物进行充分的融合之后，进行精细称量，取100ml放入量瓶中，而后加入盐酸进行溶解，到达指定刻度时，再次将其摇动，混合，使均匀，精密量取续滤液10mL置100mL量瓶中，加0.5mol/L的碳酸氢钠溶液（pH9.0）10mL，加1%2，4-二硝基氟苯乙腈溶液3mL，摇匀，置60℃水浴中暗处加热60min后取出，放冷至室温，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀。
2.3系统适用性实验
谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸理论板数分别为13954、10161、9828；各氨基酸洗脱顺序依次为谷氨酸、衍生剂峰、甘氨酸、丙氨酸（分离度依次为13.54、11.58、13.01）
2.4精密度试验
取对照品溶液20μL，反复进样5次，谷氨酸峰面积RSD=0.17%、丙氨酸峰面积RSD=0.29%、甘氨酸峰面积RSD=0.36%。
2.5线形与范围
精密称定谷氨酸对照品22mg、丙氨酸对照品8mg、甘氨酸对照品4mg置100mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶解并定量稀释至刻度，精密量取10mL置50mL量瓶中，加0.5mol/L的碳酸氢钠溶液（pH9.0）10mL，加1%2，4-二硝基氟苯乙腈溶液3mL，摇匀，置60℃水浴中暗处加热60min后取出，放冷至室温，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀，作为储备液；精密量取上述溶液3、4、5、6、7mL，分别置10mL量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀，取20μL注入液相色谱仪，以样品浓度（C）对峰面积（A）回归，谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸分别在132-308μg，48-112μg，24-56μg范围内浓度与峰面积成良好线性关系回归方程如下：
谷氨酸的回归方程：Y=6.794×10-6X+1.098×10-4
丙氨酸的回归方程：Y=3.617×10-6X+1.072×10-4
甘氨酸的回归方程：Y=3.904×10-6X+1.041×10-4
2.6回收率试验
采用加样回收法。在已知浓度的样品中加入一定量的谷氨酸对照品、丙氨酸对照品、甘氨酸对照品，按2.2.2项中的同法操作，得回收率试验溶液，测得谷氨酸的平均回收率为99.6%，RSD=0.23%、丙氨酸的平均回收率为99.3%，RSD=0.35%对照品、甘氨酸的平均回收率为99.1%，RSD=0.46%，
2.7批样品含量测定
我们从三批批谷丙甘氨酸胶囊中分别取出20粒，然后取其内部药物，进行均匀混合。依据2.2.2项的配置进行试品溶液配置，取20μL注入液相色谱仪；另取谷氨酸对照品22mg、丙氨酸对照品8mg、甘氨酸对照品4mg同法测定，按外标法以峰面积计算各重氨基酸。
总之，在我国经济不断发展与进步的形势下，做好药品测定工作，不但能够最限度的满足市场需求，同时是为人民的安全用药服务，本次试验比较成功，证明了HPLC检测法的可行性与可靠性。
结束语
文章介绍了HPLC检测法，实验证明这种测定方法，操作简单，效果好，并且重现性高，在谷丙甘氨酸胶囊中3组分的含量测定中尤为适用。进行此次试验时，工作人员对于氨基酸的衍生过程做药避光措施，同时要做到时间均匀的振荡，这样才能够是样品与衍生剂充分融合，避免因衍生不完全而导致的含量测定不准确的问题发生。
参考文献
[1]张亚茹，何玉川，张英.高效液相色谱法测定土霉素片的含量[J].实用药物与临床.2014.a
[2]何梅凤，吴伟，钟建文，郭泽莉.高效液相色谱法测定兔房水中泊沙康唑浓度[J].今日药学.2014.
[3]李秀贤，柏丹凤，田金苗，王怡君.HPLC法测定冠心丸中丹酚酸B的含量[J].辽宁中医杂志.2013.
[关键词]HPLC法；谷丙甘氨酸胶囊；含量
中图分类号：P22 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）31-0375-01
引言
男性前列腺疾病比较常见，并给患者的日常生活带来了諸多不便，谷丙甘氨酸胶囊是治疗那行排尿方便的药物，效果比较明显，而HPLC检测法是利用色谱理论对谷丙甘氨酸胶囊进行成分测定的一种方法，文章首先将这种方法进行了简单的分析，进而对HPLC法测定谷丙甘氨酸胶囊中3组分含量的具体步骤进行了分析和研究。
一、HPLC检测法
色谱理论：色谱法的分离原理是溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相之间的相互作用的大小、强弱不同，样品各组分在固定相与流动相中的溶解各不相同，从而经过固定相时的滞留时间不同，先后从固定相中流出时间各不相同。高效液相色谱法是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱法
二、仪器与方法
1.仪器：试验所采用的是高效液相色谱仪，它的产地为日本，然后还有电子天平（METTLERAE-240），用来选取药物，确定药物剂量。
2.方法：使用高效液相色谱仪进行测量的方法，叫做高效液相色谱法，通常人们也叫它为高压液相色谱、高速液相色谱以及、近代柱色谱等。这中药剂成分测定法是建立在色谱法基础之上的，以液体作为流动相，利用高压输液系统实现对溶剂检测的。它在单一溶剂以及混合溶剂中均适用，并且在很多领域已经得到了应用，例如：化工、医学、法医检测等，是一项非常重要的分离、分析技术。
三、步骤与结果
1.试验材料
谷丙甘氨酸胶囊，产地为哈药集团制药总厂；谷氨酸对照品，丙氨酸对照品；甘氨酸对照品；2，4-二硝基氟苯；乙腈。
2.试验步骤
2.1色谱条件
采用十八烷基硅烷键合硅胶柱（SGEODS-2250H4.6mm5μmSN：E05-081），0.05mol/L的醋酸钠缓冲液（pH6.4）：乙腈：水（70：15：5）为流动相，流速为1.0mL/min，进样20μL，检测波长362nm，按外标法以峰面积计算。
2.2溶液的配制
2.2.1对照品溶液的制备
进行精密称定药品时，我们选用的谷氨酸对照品为22mg、丙氨酸对照品8mg、甘氨酸对照品4mg，然后将其装入100mL的量瓶中，倒入0.1mol/L的盐酸对这些药品进行溶解、稀释，溶剂和稀释的过程中要定量进行，直到刻度为止，精密量取10mL置100mL量瓶中，加0.5mol/L的碳酸氢钠溶液（pH9.0）10mL，加1%，2，4-二硝基氟苯乙腈溶液3mL，摇匀，置60℃水浴中暗处加热60min后取出，放冷至室温，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀。
2.2.2供试品溶液的制备
进行试品溶液制备的时候，我们首先要去药品20粒，然后取出其内部的药物进行充分的融合之后，进行精细称量，取100ml放入量瓶中，而后加入盐酸进行溶解，到达指定刻度时，再次将其摇动，混合，使均匀，精密量取续滤液10mL置100mL量瓶中，加0.5mol/L的碳酸氢钠溶液（pH9.0）10mL，加1%2，4-二硝基氟苯乙腈溶液3mL，摇匀，置60℃水浴中暗处加热60min后取出，放冷至室温，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀。
2.3系统适用性实验
谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸理论板数分别为13954、10161、9828；各氨基酸洗脱顺序依次为谷氨酸、衍生剂峰、甘氨酸、丙氨酸（分离度依次为13.54、11.58、13.01）
2.4精密度试验
取对照品溶液20μL，反复进样5次，谷氨酸峰面积RSD=0.17%、丙氨酸峰面积RSD=0.29%、甘氨酸峰面积RSD=0.36%。
2.5线形与范围
精密称定谷氨酸对照品22mg、丙氨酸对照品8mg、甘氨酸对照品4mg置100mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶解并定量稀释至刻度，精密量取10mL置50mL量瓶中，加0.5mol/L的碳酸氢钠溶液（pH9.0）10mL，加1%2，4-二硝基氟苯乙腈溶液3mL，摇匀，置60℃水浴中暗处加热60min后取出，放冷至室温，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀，作为储备液；精密量取上述溶液3、4、5、6、7mL，分别置10mL量瓶中，加磷酸盐缓冲液（pH7.0）定量稀释至刻度，摇匀，取20μL注入液相色谱仪，以样品浓度（C）对峰面积（A）回归，谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸分别在132-308μg，48-112μg，24-56μg范围内浓度与峰面积成良好线性关系回归方程如下：
谷氨酸的回归方程：Y=6.794×10-6X+1.098×10-4
丙氨酸的回归方程：Y=3.617×10-6X+1.072×10-4
甘氨酸的回归方程：Y=3.904×10-6X+1.041×10-4
2.6回收率试验
采用加样回收法。在已知浓度的样品中加入一定量的谷氨酸对照品、丙氨酸对照品、甘氨酸对照品，按2.2.2项中的同法操作，得回收率试验溶液，测得谷氨酸的平均回收率为99.6%，RSD=0.23%、丙氨酸的平均回收率为99.3%，RSD=0.35%对照品、甘氨酸的平均回收率为99.1%，RSD=0.46%，
2.7批样品含量测定
我们从三批批谷丙甘氨酸胶囊中分别取出20粒，然后取其内部药物，进行均匀混合。依据2.2.2项的配置进行试品溶液配置，取20μL注入液相色谱仪；另取谷氨酸对照品22mg、丙氨酸对照品8mg、甘氨酸对照品4mg同法测定，按外标法以峰面积计算各重氨基酸。
总之，在我国经济不断发展与进步的形势下，做好药品测定工作，不但能够最限度的满足市场需求，同时是为人民的安全用药服务，本次试验比较成功，证明了HPLC检测法的可行性与可靠性。
结束语
文章介绍了HPLC检测法，实验证明这种测定方法，操作简单，效果好，并且重现性高，在谷丙甘氨酸胶囊中3组分的含量测定中尤为适用。进行此次试验时，工作人员对于氨基酸的衍生过程做药避光措施，同时要做到时间均匀的振荡，这样才能够是样品与衍生剂充分融合，避免因衍生不完全而导致的含量测定不准确的问题发生。
参考文献
[1]张亚茹，何玉川，张英.高效液相色谱法测定土霉素片的含量[J].实用药物与临床.2014.a
[2]何梅凤，吴伟，钟建文，郭泽莉.高效液相色谱法测定兔房水中泊沙康唑浓度[J].今日药学.2014.
[3]李秀贤，柏丹凤，田金苗，王怡君.HPLC法测定冠心丸中丹酚酸B的含量[J].辽宁中医杂志.2013.