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[研究目的]多囊卵巢综合征是(Polycystic ovarian syndrome,PCOS)是一种常见的女性生殖和代谢内分泌紊乱疾病,以肥胖、月经紊乱、高雄激素血症、稀发排卵或无排卵、多毛、痤疮等为主要临床表现,生育期妇女多发,是导致女性不孕的主要原因之一,导致患者的生育、远期健康和生命质量受到严重影响。PCOS的发病机制目前尚仍不明确。大量研究证实,PCOS患者长期处在慢性低度炎症的状态,表明慢性炎症反应参与到PCOS的病程发展。首都名中医付国兵教授从事临床四十余载,善于运用振腹推拿治疗内、妇、儿、男科等多种疾病,对PCOS的认识和治疗有独到的见解。本研究通过对付国兵教授的查阅发表相关的文献专著、临床跟诊以及专家访谈,总结出付国兵治疗PCOS的临床诊疗经验,并从炎症出发探讨振腹法治疗PCOS大鼠的机制原理。[研究方法]研究一:首都名中医付国兵教授治疗PCOS的临床经验总结通过查阅付国兵教授出版、参编教材及其团队发表的论文探求付国兵教授学术观点;通过临床跟诊,总结付国兵教授治疗PCOS的特色;对付国兵教授进行访谈获取相关资料,分析整理付国兵教授对PCOS的认识和治疗特色。研究二:基于JNK信号通路振腹法对PCOS大鼠炎症因子水平影响机制研究探讨6周龄SD雌性大鼠40只,屏障系统下饲养,采用随机数字表法将大鼠随机分为空白组、模型组、二甲双胍组、振腹组,每组1 0只。模型组、二甲双胍组、振腹组均采用芳香酶抑制剂造模法造模,造模结束后按照实验方案对二甲双胍组、振腹组进行干预。实验过程中定期记录大鼠体质量、动情周期变化。干预结束后,禁食12h,2%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,取腹主动脉血,ELISA法检测性激素E2、T、LH、FSH,炎症因子TNF-α、IL-6、IL-18、IL-1β的表达水平;取卵巢测量卵巢质量,计算卵巢脏器系数,HE染色观察大鼠组织形态学改变,Western Blot检测卵巢组织中JUN、p-JUN蛋白水平的相对表达。[研究结果]研究一:首都名中医付国兵教授治疗PCOS的临床经验总结1.对PCOS的认识:付国兵教授认为PCOS的病机以肾虚为本,兼以脾虚、肝郁,冲任失调,气血津液瘀滞,导致痰湿壅滞、瘀血内结,脏腑功能失常而发病。肾虚分为肾阳虚和肾阴虚(肾精亏虚),肾阳虚则真阳不足,经血化生无力,温煦无力则血脉寒涩难行,导致月经后期、月经量少、闭经;肾阳衰微推动力不足,促进卵子发育成熟能力减弱,卵子发育不成熟,肾阳虚无力推动排卵,温煦无力胞宫内寒,受精卵着床无条件而至不孕。肾阴虚即肾精不足,肾主藏精而化生气血,精血互生,冲任通调,血海充营,月水按时而至;肾主藏精而系胞,肾精旺,肾气充则精血化生有源。肾阴精不足,不能滋养胞宫,导致卵子不能按期增殖及发育成熟而无孕。肾阴肾阳消长转化正常则女子来月经、排卵正常,肾阴肾阳消长转化失常则月经不按而至出现月经延期、闭经、排卵功能失调导致不孕。此外,付国兵教授认为脾虚也是PCOS发病的关键病机,也是导致PCOS慢性炎症状态的内在病机。脾为后天之本,脾胃运化水谷生成营卫之气,营气行于脉内营养及脏腑,卫气行脉外温煦脏腑,固护周身,脾胃为气机升降之枢纽,调节全身气机升降使各脏腑功能维持正常。脾胃素虚,则运化水谷无力,气血营卫化生不足,无以营养脏腑、卫护周身,则经血量少、闭经、不易受孕;脾胃有伤,无力运化水液,则水液停聚,痰湿内生,血脉艰涩难行;气机升降失常,痰湿壅滞,瘀血内结,脏腑气化失常,气血津液代谢失衡,不能维持正常的生命活动而发病。肝气郁滞,肝失疏泄,肝气乘脾则脾虚加重;精血同源。肝不藏血,则精血化生不足,无力滋养肾精,也会加重肾精亏虚。2.学术思想:对于PCOS的治疗,付国兵教授十分重视前后天的调养与顾护,并通过神阙穴进行调养。付老认为神阙穴是神气通行之门户,先后天神气在此处交汇并藏于此处,并通过冲、任、督、带脉将全身经络联系在一起,为五脏六腑之本,十二经之根。因此,神阙穴具有固本培元、温阳固脱、健脾益胃的功效。通过神阙穴激发肾中精气,顾护胃气,影响全身经络,达到治疗作用。3.诊疗特色:付国兵教授在振腹推拿的基础上提出了“三补肾阴,一补肾阳”的治疗原则。根据月经周期的不同时期,施以不同的手法:经后期,为阴长阳消期,宜补肾阴,以填补精血为主;经间期,宜同时补肾阴肾阳,以助化阴,同时肾阳鼓动推动排卵,养血调经;经前期,补肾阴兼以少补肾阳,活血通经。研究二:基于JNK信号通路振腹法对PCOS大鼠炎症因子水平影响机制研究1.大鼠动情周期:空白组可见正常动情周期变化;模型组大鼠动情周期紊乱,仅出现动情间期。二甲双胍组在干预第10天、振腹组在干预第9天先后出现动情前期。2.大鼠体质量及卵巢质量:造模第7天后模型组、二甲双胍组、振腹组大鼠体质量明显比空白组体质量升高(P<0.05),造模结束模型组、二甲双胍组、振腹组大鼠体质量显著大于空白组(P<0.001);经二甲双胍、振腹法干预7天后,二甲双胍组、振腹组大鼠体质量虽然与模型组差异不大(P>0.05),但振腹组大鼠体质量增长率明显低于模型组(P<0.05);干预二甲双胍、振腹法14天后,各组大鼠体质量增长率无明显差异(P>0.05)。模型组、二甲双胍组、振腹组大鼠卵巢质量均明显大于空白组(P<0.001),二甲双胍组、振腹组大鼠卵巢质量与模型组无明显差异(P>0.05),但二甲双胍组、振腹组大鼠卵巢脏器系数明显低于模型组大鼠(P<0.05)。3.卵巢形态:空白组大鼠卵巢组织可见不同阶段时期的卵泡;模型组大鼠可见大量囊样空泡样卵泡,卵巢皮质间质细胞明显增生;二甲双胍组、振腹大鼠囊样空泡样卵泡数量较模型组减少。4.血清性激素水平:与空白组大鼠相比,模型组大鼠血清FSH、LH、T水平显著升高(P<0.001),二甲双胍组、振腹组大鼠血清FSH、LH、T水平明显升高(P<0.05),模型组、二甲双胍组、振腹组大鼠血清E2水平显著降低(P<0.001);与模型组大鼠相比,二甲双胍组、振腹组大鼠血清FSH、LH、T水平明显降低(P<0.05),E2水平明显升高(P<0.05);与二甲双胍组比较,振腹组大鼠LH、T水平明显降低(P<0.05),E2 水平显著升高(P<0.001)。5.血清炎症因子水平:与空白组相比,模型组、二甲双胍组、振腹组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-18、IL-1β水平显著高于空白组(P<0.001)。与模型组相比,二甲双胍组、振腹组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-18、IL-1β水平显著低于模型组(P<0.001)。与二甲双胍组比较,振腹组大鼠IL-6、IL-1β水平明显升高(P<0.05)。6.卵巢组织JUN、p-JUN蛋白相对表达:二甲双胍组、振腹组大鼠卵巢JUN、p-JUN蛋白表达水平明显比空白组升高(P<0.05),模型组大鼠卵巢JUN、p-JUN蛋白表达水平比空白组显著升高(P<0.001);与模型组相比,二甲双胍组、振腹组大鼠卵巢JUN、p-JUN蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与二甲双胍组比较,振腹组p-JUN蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。[研究结论]1.付国兵教授治疗PCOS注重培元补肾,健脾疏肝,尤其注重后天胃气的调养,以“三补肾阴,一补肾阳”为治疗原则,以神阙穴为中心,运用振腹推拿结合月经周期不同时期施以不同的治疗方法,同时注重对患者心神的调养,使患者达到形神合一的状态达到治疗作用。2.来曲唑可成功诱导PCOS大鼠模型;振腹法有效减缓PCOS大鼠体质量增长速率,降低PCOS大鼠卵巢脏器系数,恢复PCOS大鼠动情周期,调节性激素水平,促进恢复卵巢功能,对PCOS大鼠治疗疗效良好。3.来曲唑诱导的PCOS大鼠存在炎症因子异常高表达,使JNK信号通路被激活,振腹法可减轻PCOS大鼠炎症因子水平,抑制JNK信号通路激活减轻PCOS大鼠的炎症反应,改善PCOS大鼠机体内环境。