目的:在男性不育问题中,精索静脉曲张（Varicocele,VC）是导致男性不育的原因之一,但VC导致不育的具体机制仍不清楚。因此,更好地了解VC相关男性不育症的病理生理学,对于阐明VC对精子发生、睾丸功能的有害影响至关重要。新的可用于诊断、治疗男性不育,预测妊娠结果的生物学标志物的探索就显得尤为重要,前期研究提示精浆中高浓度的蛋白质是很好的研究对象。由于精液成分复杂,体液中的外泌体具有富集特定的诊断生物标记物的特征,这将有助于研究者发现相对低表达、不容易被发现的生物标记物,使得外泌体及其所包含的物质,可发挥疾病检测、治疗及评估预后的作用。外泌体及其包裹的物质作为一种新兴的生物学标志物,在众多研究中均显示出其在疾病诊断过程中的重大作用。基于课题组前期研究的精索静脉曲张不育患者精浆外泌体蛋白表达谱以及现有的文献依据,本研究将根据前期研究结果,筛选差异表达蛋白,利用生物信息学分析差异表达蛋白的生物学功能,筛选关键蛋白;同时在成功提取精浆外泌体的前提下,扩大样本量,检测精浆外泌体LGALS3BP蛋白的表达量,探讨LGALS3BP蛋白作为生物学标志物,在VC相关男性不育中的临床意义。为进一步探究VC相关男性不育的生物标志物和VC导致不育的机制提供一定的理论基础,以推动男性不育研究的进展。方法:1、根据纳入/排除标准,入组临床样本,基于TMT标记的定量蛋白组学结合串联质谱技术对精索静脉曲张不育患者精浆外泌体与正常体检者精浆外泌体的进行比较蛋白质组学研究。设定的筛选条件,筛选出并集组蛋白和交集组蛋白。使用“clusterprofile”R包对并集组蛋白质和交集组蛋白质进行GO富集分析。2、利用超高速离心法提取精浆外泌体,用WB、NTA、TEM三种方法,从外泌体表面标志物蛋白、外泌体粒径、外泌体电镜下形态三个方面鉴定外泌体。运用Western Blot、ELISA、免疫组化等方法检测该蛋白在正常男性睾丸组织、小鼠GC1、GC2、TM4细胞中、VC大鼠模型以及临床样本中验证该蛋白的表达量及细胞定位。3、最后运用统计学方法Spearman相关系数（r）,ROC曲线分析等方法验证LGALS3BP蛋白作为生物学标志物,对于VC相关男性不育的临床意义。结果:1、比较蛋白质组学研究结果为精索静脉曲张精浆外泌体蛋白质谱共鉴定出1457个蛋白质,并集组蛋白430个,交集组蛋白114个。生物信息学分析结果显示统计学差异的蛋白大多数来源于外泌体,其生物学过程有和分子功能与精子发生发展有关。2、根据前期研究结果及现有文献报道,筛选差异蛋白LGALS3BP为候选关键蛋白。3、成功鉴定精浆外泌体,并验证了差异蛋白谱的可靠度。在男性正常睾丸组织中LGALS3BP表达水平中等,定位于胞质及细胞膜。在小鼠睾丸支持细胞中该蛋白的表达水平明显高于小鼠精原细胞与小鼠精母细胞,LGALS3BP蛋白在VC不育组的精浆外泌体和大鼠睾丸组织中低表达,4、精浆外泌体LGALS3BP蛋白的表达水平和精子总数（Count）、精子总浓度（Concentration）、前向运动精子率（Progressive motility,PR）和精子总活力（PR+NP）呈正相关。ROC曲线分析结果说明相比于精浆蛋白,精浆外泌体蛋白LGALS3BP蛋白具有更高的诊断效能。结论:LGALS3BP蛋白的表达量与生精功能损害程度、精子活力、精子浓度正相关,具有潜在的诊断精索静脉曲张合并男性不育的临床价值。