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1.背景：
1.1七氟醚吸入麻醉和丙泊酚静脉麻醉广泛的应用与临床，两种麻醉都能影响肝脏血流、氧供和肝功能[1]。研究表明：麻醉可影响健康SD大鼠肝脏许多基因的表达[2]。小分子核糖核酸（micRNA）能降低信使RNA活性从而抑制蛋白的表达，micRNA能调节和控制细胞内超过30%的基因，并在细胞炎症反应、新陈代谢和增殖中发挥关键作用[3]。因此推测：麻醉剂能影响肝脏细胞micRNA的表达，所以通过TaqMan探针筛查实验（TaqMan Low-density test）探讨对丙泊酚麻醉大鼠肝脏细胞micRNA表达的影响。
2.方法：
2.1将18只健康SD大鼠（吉林大学动物实验室）重250±10g随机分成三组：七氟醚（日本）组、丙泊酚（美国）组和正常对照组。所有大鼠置于可自主呼吸的麻醉箱（日本）中，麻醉箱中持续供给40%氧气6L/min，保持箱内温度37℃。
2.2全程监测SD大鼠体温、心率、动脉血压和动脉血氧分压。实验前三组大鼠均予戊巴比妥钠50mg/kg耳缘静脉注射，麻醉后采取左侧股动脉、股静脉置管。七氟醚麻醉组予吸入2.4%七氟醚（日本）持续吸入。丙泊酚组予静脉持续泵入丙泊酚（美国）600ug/kg/min。两组麻醉时间8：00AM--2：00PM。正常对照组不予任何麻醉剂。
2.3下午2：00在SD大鼠死亡3min内取三组SD大鼠肝左叶，磷酸盐水冲洗两次后-20度保存，24h制备肝组织匀浆后离心（10000/min 4℃ 5min）提取样本。将提取的RNA和micRNA做RT-PCR。
2.4应用SPSS16.0统计学软件进行分析，所有计量数据资料均以，采用单因素方差分析，Mann Whitney U检验进行组间比较，组内正态分布数据采用配对t检验，P<0.05有统计学意义。
3.结果：
3.1比较三组SD大鼠的基本生理数据发现（表1）：七氟醚和丙泊酚麻醉组中的血压与正常对照组相比偏低，但无统计学差异（p>0.05）。七氟醚和丙泊酚麻醉组中呼吸末CO2分压较正常对照偏高，但无统计学差异（p>0.05）。各组间PH值、心率、动脉血氧分压、体温比较无统计学差异。
表1：三组SD大鼠的基本生理数据：
3.2 应有TaqMan Low-density test方法检测各组肝组织中micRNA表达情况。
3.2.1七氟烷和丙泊酚麻醉组中肝组织micRNA增加情况：与正常对照组相比：七氟烷麻醉组肝组织内mmu-micRNA-26a、mmu- micRNA-145、hsa-miRNR-378、mmu-micRNA-328、mmu-micRNA-328、mmu-micRNA-27b、mmu-micRNA-322、rno-micRNA-450a含量明显增加，有显著统计学差异（p<0.001）。与正常对照组相比：丙泊酚麻醉组肝组织内mmu-micRNA-26a、rno-micRNA-450a、mmu-micRNA-27b、
34a、mmu-micRNA-301b、mmu-micRNA-451、hsa-micRNA-378、
NA-145含量含量明显增加，有显著统计学差异（p<0.001）。
3.2.2七氟烷和丙泊酚麻醉组中肝组织micRNA减少情况：与正常对照组相比：七氟烷麻醉组肝组织内mmu-miRNA-449a、mmu-miRNA-193、mmu-miRNA-21、mmu-miRNA-67含量明显降低，有显著统计学差异（p<0.001）。与正常对照组相比：丙泊酚麻醉组肝组织内mmu-miRNA-19、mmu-miRNA-449a、mmu-miRNA-191、mmu-miRNA-186含量明显降低，有显著统计学差异（p<0.001）。
3.2.3七氟烷和丙泊酚麻醉组中肝组织micRNA表达差：TaqMan Low-density test检测方法获得七氟烷麻醉与丙泊酚麻醉对肝组织micRNA的表达存在差异，与丙泊酚麻醉组相比：七氟烷麻醉组肝组织中mmu-miRNA-142-3p、hsa-miRNA-29a#、hsa-miRNA-378含量明显降低，有显著统计学差异（p<0.001）。
4.讨论：
本实验研究结果显示：七氟醚和异丙酚麻醉影响健康SD大鼠肝脏micRNA的表达。通过定量分析不同麻醉下健康SD大鼠肝脏micRNA的表达结果表明：不同麻醉剂导致大鼠肝脏micRNA的表达变化时不同的。
5.结论：
本研究中结果显示：异丙酚麻醉和七氟烷麻醉决定肝脏内micRNA的表达模式不同。micRNA的表达模式的差异预示着不同麻醉方法的基因表达变化不同。
参考文献：
[1].Frink EJ，Jr，Morgan SE，Coetzee A，Conzen PF，Brown BR，Jr：The effects of sevoflurane，halothane，enflurane，and isoflurane on hepatic blood flow and oxygenation inchronically instrumented greyhound dogs.ANESTHESIOLOGY 1992;76：8590
[2].NakazatoK，YoshidaY，TakemoriK，KobayashiK，Sakamoto A：Expressions of genes encoding drug-metabolizing enzymes are altered after sevoflurane，isoflurane，propofolordexmedetomidine anesthesia.Biomed Res 2009;30：17–24
[3]Chen X，Murad M，Cui YY，Yao LJ，Venugopal SK，Dawson K，Wu J：micRNA regulation of liver growth after 50% partial hepatectomy and small size grafts in rats.Transplantation 2011;91：2939
1.1七氟醚吸入麻醉和丙泊酚静脉麻醉广泛的应用与临床，两种麻醉都能影响肝脏血流、氧供和肝功能[1]。研究表明：麻醉可影响健康SD大鼠肝脏许多基因的表达[2]。小分子核糖核酸（micRNA）能降低信使RNA活性从而抑制蛋白的表达，micRNA能调节和控制细胞内超过30%的基因，并在细胞炎症反应、新陈代谢和增殖中发挥关键作用[3]。因此推测：麻醉剂能影响肝脏细胞micRNA的表达，所以通过TaqMan探针筛查实验（TaqMan Low-density test）探讨对丙泊酚麻醉大鼠肝脏细胞micRNA表达的影响。
2.方法：
2.1将18只健康SD大鼠（吉林大学动物实验室）重250±10g随机分成三组：七氟醚（日本）组、丙泊酚（美国）组和正常对照组。所有大鼠置于可自主呼吸的麻醉箱（日本）中，麻醉箱中持续供给40%氧气6L/min，保持箱内温度37℃。
2.2全程监测SD大鼠体温、心率、动脉血压和动脉血氧分压。实验前三组大鼠均予戊巴比妥钠50mg/kg耳缘静脉注射，麻醉后采取左侧股动脉、股静脉置管。七氟醚麻醉组予吸入2.4%七氟醚（日本）持续吸入。丙泊酚组予静脉持续泵入丙泊酚（美国）600ug/kg/min。两组麻醉时间8：00AM--2：00PM。正常对照组不予任何麻醉剂。
2.3下午2：00在SD大鼠死亡3min内取三组SD大鼠肝左叶，磷酸盐水冲洗两次后-20度保存，24h制备肝组织匀浆后离心（10000/min 4℃ 5min）提取样本。将提取的RNA和micRNA做RT-PCR。
2.4应用SPSS16.0统计学软件进行分析，所有计量数据资料均以，采用单因素方差分析，Mann Whitney U检验进行组间比较，组内正态分布数据采用配对t检验，P<0.05有统计学意义。
3.结果：
3.1比较三组SD大鼠的基本生理数据发现（表1）：七氟醚和丙泊酚麻醉组中的血压与正常对照组相比偏低，但无统计学差异（p>0.05）。七氟醚和丙泊酚麻醉组中呼吸末CO2分压较正常对照偏高，但无统计学差异（p>0.05）。各组间PH值、心率、动脉血氧分压、体温比较无统计学差异。
表1：三组SD大鼠的基本生理数据：
3.2 应有TaqMan Low-density test方法检测各组肝组织中micRNA表达情况。
3.2.1七氟烷和丙泊酚麻醉组中肝组织micRNA增加情况：与正常对照组相比：七氟烷麻醉组肝组织内mmu-micRNA-26a、mmu- micRNA-145、hsa-miRNR-378、mmu-micRNA-328、mmu-micRNA-328、mmu-micRNA-27b、mmu-micRNA-322、rno-micRNA-450a含量明显增加，有显著统计学差异（p<0.001）。与正常对照组相比：丙泊酚麻醉组肝组织内mmu-micRNA-26a、rno-micRNA-450a、mmu-micRNA-27b、
34a、mmu-micRNA-301b、mmu-micRNA-451、hsa-micRNA-378、
NA-145含量含量明显增加，有显著统计学差异（p<0.001）。
3.2.2七氟烷和丙泊酚麻醉组中肝组织micRNA减少情况：与正常对照组相比：七氟烷麻醉组肝组织内mmu-miRNA-449a、mmu-miRNA-193、mmu-miRNA-21、mmu-miRNA-67含量明显降低，有显著统计学差异（p<0.001）。与正常对照组相比：丙泊酚麻醉组肝组织内mmu-miRNA-19、mmu-miRNA-449a、mmu-miRNA-191、mmu-miRNA-186含量明显降低，有显著统计学差异（p<0.001）。
3.2.3七氟烷和丙泊酚麻醉组中肝组织micRNA表达差：TaqMan Low-density test检测方法获得七氟烷麻醉与丙泊酚麻醉对肝组织micRNA的表达存在差异，与丙泊酚麻醉组相比：七氟烷麻醉组肝组织中mmu-miRNA-142-3p、hsa-miRNA-29a#、hsa-miRNA-378含量明显降低，有显著统计学差异（p<0.001）。
4.讨论：
本实验研究结果显示：七氟醚和异丙酚麻醉影响健康SD大鼠肝脏micRNA的表达。通过定量分析不同麻醉下健康SD大鼠肝脏micRNA的表达结果表明：不同麻醉剂导致大鼠肝脏micRNA的表达变化时不同的。
5.结论：
本研究中结果显示：异丙酚麻醉和七氟烷麻醉决定肝脏内micRNA的表达模式不同。micRNA的表达模式的差异预示着不同麻醉方法的基因表达变化不同。
参考文献：
[1].Frink EJ，Jr，Morgan SE，Coetzee A，Conzen PF，Brown BR，Jr：The effects of sevoflurane，halothane，enflurane，and isoflurane on hepatic blood flow and oxygenation inchronically instrumented greyhound dogs.ANESTHESIOLOGY 1992;76：8590
[2].NakazatoK，YoshidaY，TakemoriK，KobayashiK，Sakamoto A：Expressions of genes encoding drug-metabolizing enzymes are altered after sevoflurane，isoflurane，propofolordexmedetomidine anesthesia.Biomed Res 2009;30：17–24
[3]Chen X，Murad M，Cui YY，Yao LJ，Venugopal SK，Dawson K，Wu J：micRNA regulation of liver growth after 50% partial hepatectomy and small size grafts in rats.Transplantation 2011;91：2939