原胶原赖氨酸,2-酮戊二酸5-双加氧酶(PLOD2)是一种功能性酶,存在于细胞质的粗面内质网中,参与蛋白的翻译、修饰、纤维化和组织重塑过程。研究表明,PLOD2蛋白与肿瘤的进展、预后、转移、复发均有密切的关系。PLOD2蛋白的高表达与胶质瘤、肝癌、膀胱癌和宫颈癌等肿瘤的不良预后相关,可能成为肿瘤的预后指标。然而,PLOD2蛋白在喉癌组织中的表达情况及与喉癌预后的相关性尚不清楚。因此,本研究拟通过收集临床喉癌组织和癌旁正常组织,运用聚合酶链式反应(PCR)、蛋白印迹、免疫组化等技术对PLOD2蛋白进行测定,并采用生存分析和回归分析等统计方法分析影响喉癌预后的独立因素,进而为喉癌的预后提供标记物。　　第一部分 PLOD2蛋白在喉癌及喉癌旁正常组织中的表达　　目的：　　研究测量PLOD2蛋白在喉癌及喉癌旁正常组织中的表达情况,为喉癌的诊断及治疗提供实验依据。　　方法：　　收集广东省广州市广东省人民医院耳鼻咽喉头颈外科2008年至2015年临床诊断为喉癌的患者的肿瘤组织标本共114例,所有标本均有对应的癌旁正常组织（距离癌组织5cm以上的组织）。所有组织标本均经甲醛固定,石蜡包埋。运用聚合酶链式反应(PCR)、蛋白印迹、免疫组化等技术对喉癌组织中和癌旁正常组织中PLOD2蛋白的表达情况进行定性、定量研究。　　结果：　　(1) PLOD2蛋白在114例喉癌组织中免疫染色阳性物质呈棕色颗粒,主要存在于细胞的胞质中;显色为不同深浅的棕色,且临床分期越晚,颗粒数量越多、颜色越深。　　(2)8组喉癌组织和癌旁正常组织在PCR指标上的差异有统计学意义(p＜0.05),喉癌组的PCR水平要高于癌旁正常组。　　(3)8组喉癌组织和癌旁正常组织在蛋白印迹指标上的差异有统计学意义(p＜0.05),喉癌组织中PLOD2蛋白质表达水平要高于癌旁正常组织。　　结论：　　喉癌组织中PLOD2蛋白的表达水平要高于癌旁正常组织。　　第二部分 PLOD2蛋白与喉癌预后的相关性研究　　目的：　　研究PLOD2蛋白表达与喉癌预后的相关性,为喉癌的预后判断提供实验和理论依据。　　方法：　　收集广东省广州市广东省人民医院耳鼻咽喉头颈外科2008年至2015年临床诊断为喉癌的患者的手术标本共114例,所有喉癌的标本均有对应的癌旁正常组织。所有组织标本均经甲醛固定,石蜡包埋。生存时间从病理确诊日开始至随访日截止,或由于肿瘤的复发、转移等多种原因导致患者死亡的日期。收集喉癌临床标本病理参数（如:临床分期、TNM分期等）进行统计。利用生存分析和Cox回归分析等统计学方法分析PLOD2蛋白与喉癌预后的相关性。　　结果：　　(1) POLD2蛋白表达的高低,与临床分期、T分期有关,与N分期、M分期无关。　　(2)对喉癌患者进行生存分析发现,PLOD2蛋白低表达患者的3年和5年总生存率均为93.01％; PLOD2蛋白高表达患者的3年和5年生存率分别为70.65％和65.11％,生存率有统计学差异。　　(3)单变量Cox回归模型分析显示M分期,PLOD2蛋白表达,临床分期,T分期均是影响喉癌患者生存的高风险因素。再将与喉癌患者生存有统计学意义的风险因素进行多变量Cox回归分析显示:PLOD2蛋白表达和M分期与喉癌患者的不良预后高度相关。　　结论：　　PLOD2蛋白表达直接影响患者的生存率,而且PLOD2蛋白的高表达水平与喉癌患者的不良预后高度相关,可能成为新的喉癌预后的分子标记物。